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大鼠ELISA試劑盒測定過程的操作因素

時間:2018/9/13閱讀:243
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      大鼠ELISA試劑盒操作要素對ELISA試劑盒的影響ELISA試劑盒測定過程:固相包被→加待測樣品→溫育→洗刷+加酶標物→溫育→洗刷→加底物→溫育一加停止液→比色→斷定成果。
ELISA試劑盒操作較冗雜,在操作中應留意以下5個方面。

1. 在成批手藝檢測中,還應留意操作時差的影響。加樣及混勻時刻的差異,使抗原抗體反響和酶促反響時刻不一致,對競爭法及定量檢測影響很大,不留意可能會導致過錯成果或定量禁絕。

2. 洗刷是ELISA試劑盒操作過程中決議試驗成敗的一個關鍵過程。意圖是除掉未結合的免疫反響物,停止抗原抗體反響,除掉標本中與反響無關的成分、游離的酶標物以及反響過程中吸附于固相載體上的非特異性物質。可用洗板機洗板或手藝洗板,前者洗刷質量較好,各反響孔洗刷作用均一,批內、批間差異小,手藝洗板應留意操控各孔洗刷作用,差異不宜太大。

3. 跟著病況的發展或由其他要素影響,某些抗體在機體內的含量發作大幅動搖,因此有必要對標本進行預處理。直接法測定中,標本恰當稀釋還可下降非特異性反響。

4. 加樣一般運用加液器,在ELISA試劑盒中一般有4次加樣:加標本、加酶結合物、加底物和加停止液。加標本時有必要每份標本運用一支移液器吸嘴,避免穿插污染。加酶結合物、底物和停止液時則不需更換吸嘴。

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