大鼠ELISA試劑盒技術(shù)原理：以免疫學(xué)反響為根底，將抗原、抗體的特異性反響與酶對(duì)底

1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號(hào)。
2. 結(jié)合在固相載體外表的抗原或抗體仍堅(jiān)持其免疫學(xué)活性。
3. 酶符號(hào)的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。
4. 受檢標(biāo)本與固相載體外表的抗原或抗體起反響。再參加酶符號(hào) 的抗原或抗體，也經(jīng)過(guò)反響而結(jié)合在固相載體上。
5. 此刻固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈必定的份額。
6. 參加酶反響的底物后，底物被酶催化變成有色產(chǎn)品，產(chǎn)品的量 與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接有關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定 性或定量分析。測(cè)定辦法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水 平），而且重復(fù)性好。
 ELISA試劑盒樣本處理及請(qǐng)求：

1. 血清：室溫血液天然凝固10-20分鐘，離心20分鐘擺布（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清，保留過(guò)程中如呈現(xiàn)沉積，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的請(qǐng)求挑選EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘擺布（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清，保留過(guò)程中如有沉積構(gòu)成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無(wú)菌管搜集，離心20分鐘擺布（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清，保留過(guò)程中如有沉積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢查排泄性的成份時(shí)，用無(wú)菌管搜集。離心20分鐘擺布（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清。檢查細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度到達(dá)100萬(wàn)/ml擺布。經(jīng)過(guò)重復(fù)凍融，以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘擺布（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清。保留過(guò)程中如有沉積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
5. 安排標(biāo)本：切開標(biāo)本后，稱取分量。參加必定量的PBS，PH7.4。用液氮敏捷冷凍保留備用。標(biāo)本消融后依然堅(jiān)持2-8℃的溫度。參加必定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充沛。離心20分鐘擺布（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清。分裝后一份待檢查，其他冷凍備用。
6. 標(biāo)本收集后盡早進(jìn)行獲取，獲取按有關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行， ELISA試劑盒獲取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保留，但應(yīng)防止重復(fù)凍融。