人白介素4高敏ELISA試劑盒檢測前準備工作:
1.請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。
2.將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié) 晶,屬于正?,F(xiàn)象,可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液(加熱溫度不要超 過50℃,使用時洗滌液應(yīng)為室溫)。當日使用。
1.使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2.標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為1000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度,標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
4.生物素化抗體工作液:實驗前計算當次實驗所需用量(以100μL/孔計),實際配制時應(yīng)多配 制100-200μL。使用前15分鐘,以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作 濃度。當日使用。
5.酶結(jié)合物工作液:實驗前計算當次實驗所需用量(以100μL/孔計),實際配制時應(yīng)多配制 100-200μL。使用前15分鐘,以酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃縮HRP酶結(jié)合物(1:100)成工作濃度。 當日使用。
標準品稀釋方法圖例:(以500μL/管為例,也可根據(jù)實際用量來稀釋,如150μL/管)
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