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改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測(cè)試劑盒樣品 DNA 的制備

時(shí)間:2021/3/17閱讀:193
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改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測(cè)試劑盒樣品 DNA 的制備:

1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購(gòu)本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級(jí)版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的長(zhǎng)為 86bp 的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號(hào)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 4 號(hào)管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20  μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分。

Adenovirus(AV)腺病毒E型LAMP試劑盒
Adenovirus(AV)腺病毒F型LAMP試劑盒
Adenovirus(AV)腺病毒通用LAMP試劑盒
Aeromonas hydrophila嗜水氣單胞菌LAMP試劑盒
Aeromonas punctata斑點(diǎn)氣單胞菌LAMP試劑盒
Aeromonas salmonicida滅鮭氣單胞菌LAMP試劑盒
Aeromonas sobria溫和氣單胞菌LAMP試劑盒
Aeromonas spp.氣單胞菌通用LAMP試劑盒
Aethina tumida蜂房小甲蟲LAMP試劑盒
Afipia spp.阿菲波菌屬通用LAMP試劑盒
African Horse Sickness Virus(AHSV)非洲馬瘟病毒RT-LAMP試劑盒
African Swine Fever Virus(ASFV)非洲豬瘟病毒LAMP試劑盒
Aggregatibacter actinomycetemcomitans放線共生放線桿菌LAMP試劑盒
Ajellomyces capsulate莢膜阿耶羅菌LAMP試劑盒
Akabane Disease Virus(AKAV)牛赤羽病毒RT-LAMP試劑盒
Alastrim Virus類天花病毒LAMP試劑盒
Alcaligenes faecalis糞產(chǎn)堿桿菌LAMP試劑盒
Alcelephine Herpesvirus 1(AlHV-1狷羚皰疹病毒1型LAMP試劑盒
Aleutian Disease Virus(ADV)阿留申病病毒LAMP試劑盒
Allpaahuayo virus(ALLV)奧爾帕瓦約病毒RT-LAMP試劑盒
Alternaria spp.交鏈孢霉屬通用LAMP試劑盒
Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒RT-LAMP試劑盒


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