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裸鼠蛋白磷酸酶(PP)elisa試劑盒洗滌方法

時間:2022/2/24閱讀:212
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裸鼠蛋白磷酸酶(PP)elisa試劑盒洗滌方法:

1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板:甩盡孔內液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。

1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。

3.棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。

干4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。

5.棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度時,即可終止)。

7.每孔加終止液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。

ATG9B自噬相關蛋白9B抗體

Apg12自噬相關蛋白12抗體

ATG13自噬相關蛋白13抗體

ATG3自噬相關蛋白3抗體

phospho-ATF2 (Ser490/498)磷酸化活化復制因子2抗體

phospho-Amyloid Precursor Protein (Tyr757)磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體

ADAM18去整合素樣金屬蛋白酶18抗體

ATF6活化轉錄因子6抗體

AP2 beta銜接蛋白β抗體

Gamma-Adaptin銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體

AQP9水通道蛋白-9抗體

Annexin A3膜粘連蛋白A3抗體

Annexin IV膜粘連蛋白 A4抗體

APG8A自噬相關蛋白8A抗體

phospho-Akt (Thr450)磷酸化蛋白激酶B抗體

phospho-AMPK alpha-1 (Thr198)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

phospho-Akt(Thr308)磷酸化蛋白激酶B抗體

APOBEC3G脫氧胞苷脫氨酶蛋白抗體

AKAP13蛋白激酶錨定蛋白13抗體


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