細(xì)胞名稱(chēng) 人黑色瘤細(xì)胞系；A375[A-375]圖片
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞源于一位54歲女性黑色素瘤患者的皮膚組織，由Giard DJ建系。其染色體為超三倍體，帶有62條染色體。其中九條標(biāo)志染色體普遍存在于A375細(xì)胞中，而普通染色體N2, N6和N22在細(xì)胞中只有一條。該細(xì)胞是與中國(guó)醫(yī)學(xué)*基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞中心交換并保藏。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C165
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
人黑色瘤細(xì)胞系；A375[A-375]圖片冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
人黑色瘤細(xì)胞系；A375[A-375]圖片操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
購(gòu)買(mǎi)人黑色瘤細(xì)胞系；A375[A-375]圖片注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
NoLimits™ 50 bp DNA Fragment 10 µgpUC19 DNA 50 µg
BsuRI (HaeIII) 3000 unitspTZ19R DNA 50 µg
Pfu DNA Polymerase (native) 500 unitspUC57 DNA 50 µg
Klenow Fragment, exo– 300 unitsLambda DNA/HindIII Marker 25x50 µg
T4 Polynucleotide Kinase 2500 unitsLambda DNA/HindIII Marker, ready-to-use 5x50 µg
GeneRuler™ DNA Ladder Mix, ready-to-use 5x50 µgpBR322 DNA/AluI Marker, ready-to-use 50 µg
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase 2500 unitsLambda DNA/EcoRI+HindIII Marker 5x50 µg
Lambda DNA/HindIII Marker, ready-to-use 5x50 µgLambda DNA/EcoRI+HindIII Marker 25x50 µg
TrueStart™ Hot Start Taq DNA Polymerase 500 unitsLambda DNA/EcoRI+HindIII Marker, ready-to-use 5x50 µg
NoLimits™ 7000 bp DNA Fragment 10 µgpUC19 DNA/MspI (HpaII) Marker 50 µg
MunI (MfeI) 300 unitspUC19 DNA/MspI (HpaII) Marker 5x50 µg
pUC18 DNA 50 µgpUC19 DNA/MspI (HpaII) Marker, ready-to-use 50 µg
絡(luò)塞琳 b-D-Glucopyranoside,(2E)-3-phenyl-2-propen-1-yl 6-O-a-L-arabinofuranosyl- 84954-93-8 C20H28O10Luculia pincia 2,4-Dihydroxyacetophenone 2,4-二羥基苯乙酮 89-84-9 C8H8O3 ≥95%
積雪草酸 asiatic acid 464-92-6 488.7 C30H48O5大魚(yú)藤樹(shù)Derris robusta 3'-Methoxydaidzein none 21913-98-4 C16H12O5 ≥95%
長(zhǎng)序虎皮楠Daphniphyllum longeracemosum Deoxycalyciphylline B none 619326-74-8 C22H31NO2 ≥98%矮楊梅Myrica nana Myricananin A none 1079941-35-7 C20H24O5 ≥95%
甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch. Licochalcone B 甘草查爾酮B 58749-23-8 C16H14O5 ≥98%酸棗Ziziphus psinosa Hu Jujuboside A 酸棗仁皂苷A 55466-04-1 C58H94O26 ≥98%
茜草科巴戟天屬植物巴戟天 MorindaofficinalisHow. Deacetylasperulosidic acid 去乙酰基車(chē)葉草苷酸 14259-55-3 C16H22O11 ≥98%mulberroside A 桑皮苷A 102841-42-9 568.5239 C26H32O14
6078-17-7 * BERBAMINE DIHYDROCHLORIDE 323.2601 C17H18N2.2[HCl]金銀忍冬Lonicera maackii 2,3,2",3"-Tetrahydroochnaflavone 2,3,2",3"-四氫金連木黃酮 678138-59-5 C30H22O10 ≥98%
直桿桉Eucalyptus maideni Macrocarpal A 大果桉醛 A 132951-90-7 C28H40O6 ≥97.5%4046-02-0 阿魏酸乙酯 ethyl 4-hydroxy-3-methoxycinnamate 222.23716 C12H14O4
狼牙刺Sophora viciifolia Viniferol D 葡萄醇 D 625096-18-6 C42H32O9 ≥98%羊藿Epimedium brevicornum Icaritin 去水羊藿黃素 118525-40-9 C21H20O6 ≥95%
半邊旗Pteris semipinnata ent-9-Hydroxy-15-oxokaur-16-en-19-oic acid 等效-9-羥基-15-氧代-16-貝殼杉烯-19-酸 77658-39-0 C20H28O4 ≥98.5%66056-22-2 當(dāng)歸酰戈米辛H Angeloyl gomisin H
人黑色瘤細(xì)胞系；A375[A-375]圖片水流豆 Pongamia pinnata,莫里魚(yú)藤* Derris mollis Kranjin 水黃皮素 521-88-0 C18H12O4 ≥98%大果榕Ficus auriculata Derrone 5-羥基-3-(4-羥基苯基)-8,8-二甲基-4H,8H-苯并[1,2-b:3,4-b']二吡喃-4-酮 76166-59-1 C20H16O5 ≥95%
Acetyl Cimigenol-3-O-α-L-arabinopyranside 乙酰升麻醇-3-O-α-L-阿拉伯糖苷 402513-88-6 662.86 C37H58O10Palmatine chloride 鹽酸巴馬汀;*;棕櫚堿 10605-02-4 387.86 C21H22ClNO4
527-95-7 草質(zhì)素;蜀葵苷元;蜀葵甙元;3,4',5,7,8-五羥基黃酮 4H-1-Benzopyran-4-one,3,5,7,8-tetrahydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)- 302.2357 C15H10O7女貞Ligustrum lucidum Fraxiresinol 1-O-glucoside none 89199-94-0 C27H34O13 ≥95%
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