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ELISA試劑盒組成結構修正

閱讀:142發(fā)布時間:2017-11-28

1. 加規(guī)范品:在酶標包被板上設規(guī)范品孔,順次參加不同濃度的規(guī)范品50ul(主張每個濃度做2個平行孔)
2. 加樣:ELISA試劑盒別離設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其他各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl,然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,悄悄晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:
ELISA試劑盒除空白孔外每孔參加酶標試劑50μl。
7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先參加顯色劑A50μl,ELISA試劑盒再參加顯色劑B50μl,悄悄震動混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 停止:每孔加停止液50μl,停止反響(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:
ELISA試劑盒以空白空調零,450nm波長依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加停止液后15分鐘以內進行。


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