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如何有效避免ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)誤差

閱讀:168發(fā)布時(shí)間:2018-1-4

ELISA試劑盒查驗(yàn)技師應(yīng)具有從事試驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。
能嫻熟操作試驗(yàn)儀器、器械,具有必定總結(jié)和剖析疑問(wèn)的才調(diào),對(duì)試驗(yàn)中呈現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善處理。
怎么減小ELISA試驗(yàn)中的過(guò)錯(cuò)呢?要從天然要素(試劑安穩(wěn)性、率、儀器精密度)和人為要素(操作者)兩個(gè)方面下手:
運(yùn)用校對(duì)過(guò)的微量移液器,打掃天然過(guò)錯(cuò)。移液器與否對(duì)定量檢查尤為首要。
值得改善的本地,重復(fù)試驗(yàn)斷定建立后才調(diào)改善,比如洗板次數(shù)的把握等。
加樣要、敏捷。化學(xué)理論標(biāo)明,生成物的量與反響物的量成正有關(guān)。
評(píng)估試劑的實(shí)用性。
試劑的安穩(wěn)與否,對(duì)率的凹凸到頭首要。
ELISA試劑盒試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽(yáng)對(duì)照及樣品重復(fù)對(duì)比試驗(yàn),斷定試劑契合央求后方可運(yùn)用。
操作前仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)。
嚴(yán)峻依照說(shuō)明書(shū)央求進(jìn)行規(guī)范化操作。
ELISA試劑盒不一樣批號(hào)的試劑不行混用。
加樣不,酶生成物的量不能斷定,直接影響顯色作用。
顯色的深淺及A值的測(cè)定與參加顯色劑和間斷液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。
央求在必定時(shí)刻內(nèi)加樣結(jié)束的試驗(yàn),如果加樣緩慢,便呈現(xiàn)過(guò)錯(cuò),并且試劑長(zhǎng)期顯露在外,特別室溫過(guò)高時(shí),保存期會(huì)縮短甚至失效。
顯色時(shí)刻過(guò)短,參加間斷液反響間斷后,底物聯(lián)絡(luò)物的量過(guò)少,易呈現(xiàn)假陰性。
逾越顯色央求時(shí)刻后顯色,應(yīng)判為假陽(yáng)性,這或許與試劑自身有關(guān)。
洗板不*,酶聯(lián)絡(luò)物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性。
洗刷液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳腐的洗刷液會(huì)呈現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也或許呈現(xiàn)假陽(yáng)性。
嚴(yán)控反響時(shí)刻。
反響時(shí)刻過(guò)長(zhǎng),酶失活;反響時(shí)刻過(guò)短,酶聯(lián)絡(luò)物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛聯(lián)絡(luò),生成物構(gòu)造懈怠不強(qiáng)健,簡(jiǎn)略洗掉,都或許構(gòu)成假陰性。
嚴(yán)峻把握顯色時(shí)刻。
加顯色劑后當(dāng)即顯色,不行報(bào)陽(yáng)性,這或許是本底顯色的作用。
ELISA試劑盒留神試劑保存期,過(guò)保存期的試劑不能運(yùn)用。

 


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