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ELISA試劑盒實驗操作技巧有好方法

閱讀:193發(fā)布時間:2018-1-8

ELISA試劑盒選用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。該法適于測定細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清、血漿及組織液中的樣本,攪擾小能夠測到每毫升納克水平的細(xì)胞因子(或受體)的水平。在這種測定辦法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體。
②酶標(biāo)記的抗原或抗體。
③酶效果的底物。
根據(jù)ELISA試劑盒試劑的來歷和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測辦法。  
(一)雙抗體夾心法。
(二)雙位點一步法。
(三)間接法測抗體。
(四)競爭法。
(五)捕獲法測IgM抗體。
(六)運(yùn)用親和素和*。
遍及用作非放射性同位素的成鍵化驗. 在這種辦法中, 一般規(guī)范配體是固定的, 經(jīng)過參加溶液相受體或蛋白質(zhì)來使之成鍵. 經(jīng)過參加與受體特異性反響的抗體來定量成鍵的受體, 并且開始抗體的量以參加第二種能顯色的抗體丈量. 第二種抗體能辨認(rèn)抗體的結(jié)尾, 在其結(jié)尾的堿性磷酸酯或過氧化物酶等與酶發(fā)作反響, 從而使溶液顯色.
ELISA試劑盒操作注意事項
1. 試劑盒保存在2-8℃,運(yùn)用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這歸于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再運(yùn)用。
2. 試驗中不必的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 嚴(yán)格依照闡明書中標(biāo)明的時刻、加液量及次序進(jìn)行溫育操作。4. 一切液體組分運(yùn)用前充沛搖


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