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技術(shù)文章

如何挑選ELISA試劑盒樣品中檢測物

閱讀:360發(fā)布時間:2018-4-12

假如ELISA試劑盒試驗君的試驗樣品為人、小鼠或大鼠樣品,那么要挑選一個適宜的試劑盒相對簡單,但假如您的試驗樣品來歷于別的物種如雞、牛、猴等,則市面上能供給的試劑盒品種卻很少。且不行輕信能供給近萬種試劑盒,覆蓋多物種的供貨商。但假如又非要檢查這些物種的目標時,要對待檢物(如有種屬差異性)進行同源性剖析以及試劑盒的種屬穿插反響數(shù)據(jù)。關(guān)于樣品類型而言,一般的商業(yè)化試劑盒都通過血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清液的驗證。在挑選試劑盒時,要具體閱覽說明書,比方血漿樣本抗凝劑的運用是不是與試劑盒兼容。別的,在某些景象下樣品中會存在攪擾要素比方溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(HAMA)、細胞培養(yǎng)上清中含胎牛血清等。
ELISA試劑盒因而需依據(jù)樣品來挑選試劑盒,必要時還要依據(jù)樣正本恰當優(yōu)化。或在樣品搜集前,先閱覽一些牢靠供貨商試劑盒的說明書或直接咨詢。假如您的樣品為安排或細胞裂解物,則需求更慎重的挑選試劑盒。市面上大多數(shù)的商業(yè)化試劑盒沒有通過多種來歷安排樣本的驗證。這需求試驗君能了解不是一切試劑盒所用的抗體對,都能特異的從一堆裂解物蛋白中特異檢出您的意圖蛋白,還要思考安排樣品的基質(zhì)效應(yīng)(Matrix Effect)等。但假如試驗君要了解安排樣品的制備疑問,咱們另起一文來總結(jié)。
依據(jù)樣品中檢查物水平來挑選科研ELISA試劑盒
ELISA試劑盒假如試驗君關(guān)于樣品中待檢物的水平?jīng)]有任何可參閱的數(shù)據(jù),挑選寬動力學(xué)檢查規(guī)模的試劑盒。假如樣品中待檢物的含量很低,主張?zhí)暨x高靈敏度的試劑盒。為了下降基質(zhì)效應(yīng),有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。假如樣品中待檢物含量遠超過試劑盒的檢查規(guī)模(標曲規(guī)模), 也需做恰當?shù)谋稊?shù)稀釋。在zui終計算結(jié)果時,需乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
ELISA試劑盒一般而言,商業(yè)化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供貨商的試劑盒對樣品的用量請求可少至10ul。假如您的樣品很寶貴或較難獲取,則需求仔細思考試劑盒對樣品用量的請求。假如樣品量少,且要做多因子檢查時更需慎重。


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