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公司動(dòng)態(tài)

ELISA試劑盒洗液運(yùn)用準(zhǔn)則與洗刷方法

閱讀:75發(fā)布時(shí)間:2017-8-3

洗刷在ELISA試劑盒過程中雖不是一個(gè)反響步驟,但卻也決議著試驗(yàn)的勝敗。ELSIA就是靠洗刷來到達(dá)別離游離的和結(jié)合的酶符號(hào)物的意圖。
ELISA試劑盒洗刷液運(yùn)用原則
1.某一項(xiàng)意圖洗液主張運(yùn)用該試劑盒內(nèi)的洗液; 
2.同一elisa試劑盒洗液用完了,主張選用同一批號(hào)的洗液; 
3.同一批號(hào)的洗液也用完了,主張選用同一項(xiàng)意圖試劑洗液; 
4.同一項(xiàng)意圖洗液用完了,主張運(yùn)用該項(xiàng)目其他廠家的洗液; 
5.同一項(xiàng)目一切廠家都用完了,主張選用同一系列項(xiàng)意圖洗液(比方甲乙丙丁戊庚肝抗體檢測(cè),屬于肝炎系列,急用時(shí)能夠暫時(shí)混用); 
6.不主張國(guó)產(chǎn)洗液與進(jìn)口洗液混用,也更不主張不同系列項(xiàng)意圖洗液混用,這兩點(diǎn)都是因?yàn)橄匆旱难b備成分不同,特別是不同項(xiàng)意圖洗液(正規(guī)試劑廠家),主要組分都不太一樣。 
雖然對(duì)強(qiáng)陽性標(biāo)本影響不是很大,但關(guān)于臨界陽性陰性(灰區(qū))標(biāo)本影響較大,所以不發(fā)起不同系列項(xiàng)目洗液混用。
Elisa試劑盒洗刷方法
(1)浸泡式 
a.吸干或甩干孔內(nèi)反響液;
b.用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔后,即甩去);
c.浸泡,即將洗刷液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖擺,浸泡時(shí)刻不行隨意縮短;
d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
e.重復(fù)操作c和d,洗刷3-4次(或按闡明規(guī)則)。在間接法中如本底較高,可增加洗刷次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)刻。
微量滴定板多選用浸泡式洗刷法。洗刷液多為含非離子型洗刷劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的,非離子型洗刷劑既含疏水基團(tuán),也含親水基團(tuán),其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合,然后削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合,并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用,使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀況,然后脫離固相載體。洗刷液中的非離子型洗刷劑一般是吐溫20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時(shí),可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度。
(2)流水沖刷式 
流水沖刷法開始用于小珠載體的洗刷,洗刷液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗刷時(shí)附接一特別設(shè)備,使小珠在流水沖擊下不斷地翻滾淋洗,繼續(xù)沖刷2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖刷式則比如淋浴,其洗刷作用更為*,且也簡(jiǎn)潔、快速。已有試驗(yàn)標(biāo)明,流水沖刷式同樣也適用于微量滴定板的洗刷。洗刷時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔外表,洗刷作用更佳。 
ELISA試劑盒操作中,洗刷是zui主要的關(guān)鍵技術(shù),應(yīng)引起操作者的高度重視,操作者應(yīng)嚴(yán)厲按要求洗刷,不得大意。


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