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公司動態(tài)

ELISA試劑盒與待測抗原含量呈負(fù)相關(guān)

閱讀:87發(fā)布時間:2017-11-20

依據(jù)檢測意圖和ELISA試劑盒操作過程不同,有以下三種類型的常用辦法:3.1間接法 此法是測定抗體zui常用的辦法。將已知抗原吸附于固相載體。加人待檢標(biāo)本(含相應(yīng)抗體)與之結(jié)合。洗刷后,加人酶標(biāo)抗球蛋白抗體(酶標(biāo)抗抗體)和底物進(jìn)行測定。3.2雙抗體夾心法 此法常用于測定抗原。
將已知抗體吸附于固相載體,加人待檢標(biāo)本(含相應(yīng)抗原)與之結(jié)合。溫育后洗刷,加人酶標(biāo)板中。3.3競爭法 此法可用于抗原和半抗原的定量測定,也可用于測定抗體。以測定抗原為例,將ELISA試劑盒特異性抗體吸附于固相載體。參加待測抗原和一定量的酶標(biāo)已知抗原,使二者竟?fàn)幣c固相抗體結(jié)合;通過洗刷別離,zui終結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原。
一、ELISA試劑盒酶聯(lián)免疫吸附法測定抗體含量(競爭法)1、儀器設(shè)備酶聯(lián)免疫檢測儀(Bio-550);酶標(biāo)板 (96孔);微量注射器。2、試劑(1)HRP符號羊抗兔Ig G(1:1 000,國產(chǎn));規(guī)范牛IgG;兔抗牛血清(1:256);(2)包被液:0.05mol/L pH9.6碳酸緩沖液,4℃,保存, Na2CO3 0.15g, NaHCO3 0.293g,蒸餾水稀釋至100 mL。 (3)ELISA試劑盒稀釋液與洗刷液:0.01mol/LpH7.4 PBS--Tween--20, 4℃,保存。NaCl 8g, KH2PO4 0.2g, Na2HPO4&12H2O 2.9g, Tween20,0.5mL。蒸餾水加至1000mL。


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