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如何更好的做ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)曲

閱讀:377發(fā)布時(shí)間:2018-1-18

ELISA試劑盒試驗(yàn)標(biāo)曲做欠好是什么原因,由于剛觸摸elisa試驗(yàn),仍是歸于新手,研討大鼠干擾素相關(guān)目標(biāo)的試驗(yàn),做完大鼠γ干擾素ELISA試驗(yàn)后反響規(guī)范曲線的梯度都欠好。剛加完顯色劑的時(shí)分梯度還算顯著,可是顯色比較淺,跟著時(shí)刻延伸(大概6、7分鐘)今后梯度就不顯著了。停止反響后測(cè)得的值梯度就沒(méi)有了。
ELISA試劑盒試驗(yàn)標(biāo)曲做欠好是什么原因:
1、剛加完顯色劑時(shí)梯度顯著:顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的。

2、酶濃度太高,導(dǎo)致zui終顯色結(jié)果都是高的。
3、包被-酶標(biāo)體系不匹配或許酶標(biāo)的非特異反響太強(qiáng),或許酶標(biāo)儀讀數(shù)規(guī)模不行,
4、樣本中有能夠催化底物的物質(zhì),沒(méi)洗下來(lái)。
5、主張:包被、酶標(biāo)重新做梯度,先用較低的濃度把梯度探索好,然后再優(yōu)化靈敏度,zui終調(diào)出所需的靈敏度、線性規(guī)模。
6、有條件的話,能夠把酶免的蛋白體系移植到板式化學(xué)發(fā)光上,加完底物三分鐘讀數(shù)。
7、蛋白體系靈敏度夠的話,顯色十分鐘就差不多了。
8、
ELISA試劑盒酶是自己標(biāo)的這種狀況的,HRP份額不要太高。


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