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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)加樣防錯(cuò)小經(jīng)驗(yàn)跟常見問(wèn)題解決

閱讀:126發(fā)布時(shí)間:2018-2-1

ELISA試劑盒加樣時(shí)的防錯(cuò)小經(jīng)驗(yàn):
(1)用一張寫滿字的紙,字越多越好,比方報(bào)紙,墊在下面,這樣,加過(guò)標(biāo)本的小孔看過(guò)去下面的字會(huì)變小,沒(méi)加的字正常,十分簡(jiǎn)單區(qū)別。
(2)能夠運(yùn)用液面反光與沒(méi)有加的孔加以區(qū)別
(3)在標(biāo)本加完后,再把加樣槍全壓下,使液面發(fā)生小氣泡,也能夠加以區(qū)別
ELISA試劑盒試驗(yàn)*常見問(wèn)題解答:
問(wèn):做直接Elisa法測(cè)驗(yàn)小鼠血清中的IgE抗體,設(shè)空白對(duì)照、和陰性對(duì)照、陽(yáng)性血清稀釋倍數(shù)為5千、1萬(wàn)、10萬(wàn)、20萬(wàn)不等,用的是*符號(hào)的羊抗鼠IgE抗體,和親和素的辣根過(guò)氧化物酶。但是結(jié)果除了空白對(duì)照孔沒(méi)有色彩外,其他各孔全有色彩,并且OD值都相差不大,為什么?
答復(fù):ELISA試劑盒可能原因如下:
(1)水質(zhì)被金屬離子等污染;避免方法盡量運(yùn)用新鮮水或蒸餾水。
(2)洗刷不充沛,樣品中其它成分殘留或酶殘留;避免方法洗刷液應(yīng)注滿微孔,充沛洗刷。
(3)移液頭重復(fù)運(yùn)用,未洗凈或消毒不*;避免方法移液頭一次性運(yùn)用。
(4)酶標(biāo)板靈敏度過(guò)高。
(5)一抗顯色時(shí)間的操控等等,關(guān)于ELISA的每一步都要注意才行。

 


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