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培養(yǎng)人源細(xì)胞生長減慢可能原因
(1)由于更換不同培養(yǎng)液或血清
(2)培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如*或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。
(3)培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染
(4)試劑保存不當(dāng)
(5)接種細(xì)胞起始濃度太低
(6)細(xì)胞已老化
(7)支原體污染
建議解決方法
(1)比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn)。讓人源細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。
(2)換入新鮮配制培養(yǎng)液,或補(bǔ)加*及生長因子。
(3)用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物。或用抗生素除菌。
(4)血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存。含血清*培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2 周內(nèi)用完。
(5)增加接種細(xì)胞起始濃度。
(6)換用新的保種人源細(xì)胞。
(7)分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
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