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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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懸浮細(xì)胞的染色技術(shù)參數(shù)

時間:2017-5-23閱讀:122
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懸浮細(xì)胞的染色:

(1)收獲正常和誘導(dǎo)凋亡的細(xì)胞(0.5~1′106),PBS洗2次,1000rpm′10min。

(2)3%多聚甲醛冰浴10min,PBS洗2次,1000rpm′10min。

(3)加入PBS-T溶液,37°C孵育15min,PBS洗2次,1000rpm′10min。

(4)加入200ml胎牛血清,室溫反應(yīng)30min。

(5)加入5ml FITC標(biāo)記的TFAR19單抗(終濃度為1:40),4°C反應(yīng)30min

(6)熒光細(xì)胞洗液洗2次,1000rpm′10min。

結(jié)果觀察:將細(xì)胞沉淀滴片,熒光顯微鏡及共聚焦激光顯微鏡下觀察TFAR19在細(xì)胞中的定位。同時用流式細(xì)胞計定量檢測TFAR19蛋白的平均熒光強(qiáng)度。

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