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人脂肪間充質干細胞傳代說明

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人脂肪間充質干細胞傳代說明
備注1:由于人間充質干細胞*培養液是低血清培養液,需要提前取少量人間充質干細胞*培養液,額外加入10% FBS,作為*消化終止液使用。 
備注2:細胞不能太密集,否則容易分化。 
1,待細胞長到70%-80%滿時進行傳代(見備注2),一般3-5天,具體視細胞生長情況而定。 ,
2,吸除廢液。 
3,用PBS(不含鈣鎂離子)輕輕沖洗一遍。 
4,加入1-2 ml的0.05% *(含EDTA)至培養瓶,輕輕晃動,使*覆蓋底面,置于37℃培養箱內消化細胞。 
4,在顯微鏡下觀察,直至細胞層全部脫落(一般需要1-2 min)。 
5,加2 ml *消化終止液(即備注1中:額外加入10% FBS的人間充質干細胞*培養液)終止消化。 
6,1000 rpm離心5 min,去上清,加入人間充質干細胞*培養液2 ml。 ,
7,多次輕輕吹打細胞,制成單細胞懸液。 
8,按照1:2-1:3的比例進行傳代。 
9,放入37℃培養箱內培養。 

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