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血清中的沉淀物對細(xì)胞培養(yǎng)的影響

時間:2017-4-28閱讀:251
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(1)ATCC細(xì)胞生長,我們的試驗(yàn)以及經(jīng)驗(yàn)表明沉淀物不會影響細(xì)胞培養(yǎng),我們的客戶以及其它血清生產(chǎn)商也證明了這一點(diǎn)。

(2)過濾,如果血清中出現(xiàn)大量的沉淀物,血清將很難過濾。一般說來,因?yàn)樵谘迳a(chǎn)時zui后已經(jīng)經(jīng)過100nm或者40nm的過濾處理,并且經(jīng)過了嚴(yán)格的無菌檢測,因此不*再過濾用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清。在實(shí)驗(yàn)室中沒有必要再過濾處理血清,在大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)中往往將血清直接加到培養(yǎng)基中一起過濾。

3)污染,磷酸鈣往往被誤認(rèn)為微生物污染而引起爭端。研究者可能會在血清中觀察到一些絮狀的沉淀,因此就會比較警覺的去做無菌試驗(yàn),將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)幾天,結(jié)果可能會觀察到更多的絮狀沉淀,因此就斷定血清被污染了。并且當(dāng)研究者將血清樣品放在倒置顯微鏡下觀察時往往可以看到一些可以運(yùn)動的小黑點(diǎn),因此就更加確認(rèn)是血清被污染了。于是,ATCC細(xì)胞研究者就會花費(fèi)更多的時間和精力來和生產(chǎn)商確認(rèn),但zui終確定血清沒有被污染而只是沉淀。為了避免這些問題的發(fā)生,我們建議不要直接將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)觀察是否有菌,而是將血清加到瓊脂板上進(jìn)行培養(yǎng)以觀察是否有細(xì)菌生長。另外,也可以進(jìn)行革蘭氏染色,在油鏡下觀察,以確認(rèn)是否有污染。

首先要注意正確的血清解凍步驟,而且溶解過程中一定要每隔一段時間均勻而緩慢的搖動血清。我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在下列情況下沉淀物可能增加,使用中應(yīng)該盡量避免:(1)熱滅活血清;(2)在37℃下培養(yǎng)血清;(3)反復(fù)凍融;(4)γ射線照射;(5)*儲存在2-8℃;(6)ATCC細(xì)胞在室溫下放置時間過長

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