网红主播精品视频在线观看_草久在线播放_免费人成在线观看成人片_国产高清乱子精品偷伦对白_国产无遮挡色视频免费观看性色_亚洲精品色婷婷在线影院

上海莼試生物技術有限公司
免費會員

人源細胞進行染色的工作原理

時間:2018-1-26閱讀:104
分享:

人源細胞將rMSCs接種于24孔板中, 24 h 后饑餓處理24 h。配置適量30 μmol/L EdU培養基, 無血清培養組作為對照組, 10%血清*培養基組作為陽性對照組。細胞在各組EdU培養基中孵育24 h后通過4%多聚甲醛固定細胞。Apollo®和Hoechst33342分別對新生細胞核以及全部細胞核進行染色, 熒光顯微鏡下觀察并照相記錄, 利用ImageJ2對結果進行分析處理。

 RT-PCR

 使用RNA提取試劑盒提取細胞總 RNA, 根據逆轉錄試劑盒說明書執行逆轉錄。在RTPCR反應中, SDF-1、CXCR4和β-actin的引物序列見表1。PCR擴增條件為: 97 °C預變性3 min; 97 °C 變性15 s, 55.5 °C退火30 s, 72 °C延伸15 s, SDF-1、 CXCR4和β-actin的循環次數分別為29、33和21; 72 °C 延伸7 min。PCR產物通過Gold View核酸染料染色的 1.5%瓊脂糖凝膠電泳分離。以β-actin為內參評價SDF-1和CXCR4基因水平表達的變化。
 Western blot

加入含有蛋白酶抑制劑以及磷酸酶抑制劑混合物I和II的細胞裂解液提取蛋白, 通過10% SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)分離蛋白質, 電泳后電轉至PVDF膜。5%脫脂牛奶室溫孵育1 h后分別與CXCR4、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)和總ERK1/2(t-ERK1/2)抗體4 °C孵育過夜, 人源細胞與辣根過氧化物酶標記的二抗(山羊抗兔)室溫孵育1 h。ECL發光液顯色后通過Bio-Rad顯影儀采集分析圖像。以 β-actin為內參評價CXCR4蛋白水平的表達變化, 以 t-ERK1/2為內參評價p-ERK1/2的表達變化。
 Nogo受體作用蛋白IgG     磷酸化鳥苷酸調節蛋白12    小鼠水通道蛋白2(AQP-2)
 NUP54IgG     酸敏感離子通道1    小鼠水通道蛋白1(AQP-1)
 N-鈣粘附分子IgG     p53凋亡刺激蛋白1    小鼠水通道蛋白0(AQP-0)
 N-甲基嘌呤DNA糖基化酶IgG     P53凋亡刺激蛋白2    小鼠瘦素(LEP)
 N-乙酰基轉移酶2IgG     谷草轉氨酶    小鼠嗜酸性粒陽離子蛋白(ECP) 
 O6甲基*DNA甲基轉移酶IgG     G蛋白偶聯受體激酶相互作用蛋白1    小鼠嗜酸粒趨化因子(ECF)
 p19ARF抑癌基因IgG     血管緊張素原    小鼠嗜酸粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)
 p21IgG     磷酸化G蛋白偶聯受體激酶相互作用蛋白1    小鼠嗜環蛋白/親環素A(CyPA) 
 p21激活激酶1IgG     磷酸化G蛋白偶聯受體激酶相互作用蛋白1    小鼠*結合蛋白4(RBP-4) 
人源細胞

 

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 亚洲精品无码一区二区三区 | 第一福利所导航 | 在线中文字幕不卡 | 国产一级又黄 | 欧美无砖区准a | 激情婷婷五月天 | 精品国产午夜福利精品推荐 | 日日cao| 一个人免费看的WWW在线观看 | 欧美精品毛片久久久久久久 | 欧美亚洲精品一区二区三区在线观看 | 亚洲精品美女久久久久99 | 99久久99久久精品国产片果冻 | 亚洲顶级毛片 | 男女啪啪抽搐呻吟高潮动态图 | 久久久亚洲欧洲 | 日本免费网站在线观看 | 99精品一级欧美片免费播放资讯 | 日本a一区二区 | 国产白浆二区二区精品视频 | 亚洲国产精品视频一区二区三区 | 一区二区三区日韩在线观看 | 国产69精品久久久久9999APGF | 成人国内精品久久久久一区 | 91毛片网 | 最近2018中文字幕视频免费看 | 99在线精品视频免费观看软件 | 狠狠干视频网 | 视频在线观看一区二区三区 | 免费看av成人 | 丁香花在线影院观看在线播放 | 欧洲一区二区三区在线 | 亚洲av无码成h人动漫在线观看3d | 极品少妇被猛的白浆直喷白浆 | AV无码人妻中文字幕 | 欧美性视频在线播放 | 可以直接看的无码AV | 啊灬啊灬啊灬快灬高潮了听书 | 日本免费不卡 | 色婷婷综合久久久久中国一区二区 | 自拍偷拍国产精品 |