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上海莼試生物技術有限公司
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ATCC細胞預期數量

時間:2018-4-2閱讀:118
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ATCC細胞采用間接ELISA法檢測所獲得的單克隆抗體細胞株的細胞上清和腹水效價。以 40 倍稀釋的免疫小鼠血清作為陽性對照,以 DMEM 細胞培養液、樣品稀釋液及健康小鼠血清作為陰性對照。以 A. acidoterrestris (ATCC49025)菌原液作為抗原包被酶標板,包被濃度為 1.475×106 個/mL,每孔 0.1 mL,37 °C 2 h,4 °C 過夜;拍干后加入封閉液 37 °C 封閉 2 h,拍干后進行檢測。加入倍比稀釋的細胞上清或腹水,37 °C 孵育 0.5 h,洗滌 3 次,再加入 1:20 000 稀釋的 HRP 標記的羊抗鼠抗體,37 °C 孵育 0.5 h,洗滌后加底物顯色 10 min,加終止液終止反應,用酶標儀測定 OD450值, P/N≥2.1 為陽性,否則為陰性。
單克隆抗體亞類鑒定如表6所示;細胞培養上清、腹水效價測定及亞類鑒定結果。由表 7 可知,3F7 和 9C4 的抗體細胞上清效價和腹水效價較穩定,而 3E12 抗體細胞上清效價檢測時跳孔嚴重,腹水無效價,這與其抗體亞類不同密切相關。
取對數生*ATCC細胞于 10%血清培養基中培養 48−54 h,將秋水仙素加入培養液,使其終濃度為 0.1 µg/mL,繼續培養 4−6 h。小心吹打貼壁細胞, 1000 r/min 離心 10 min 后進行低滲處理。隨后固定細胞、制片,用新鮮Giemsa染色液染色10−20 min,鏡檢觀察記錄并進行顯微拍照。染色體計數結果發現:所得雜交瘤細胞的染色體數目處于 98−100 條之間,符合預期數量。
中藥對照藥材    牛膽粉    50mg    中藥對照藥材
中藥對照藥材    *    1.0g    中藥對照藥材
中藥對照藥材    火麻仁    2.0g    中藥對照藥材
中藥對照藥材    石菖蒲    1.0g    中藥對照藥材
中藥對照藥材    土荊皮(金錢松)    1.0g    中藥對照藥材
中藥對照藥材    百合    1.0g    中藥對照藥材
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中藥對照藥材    紅芪    5g    中藥對照藥材
ATCC細胞

 

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