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上海莼試生物技術有限公司
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ATCC細胞貼壁速度慢

時間:2018-4-13閱讀:105
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根據ATCC細胞比成纖維細胞培養基貼壁速度慢的特點,并結合使用不加血清的營養液,把含有兩類細胞的細胞懸液反復貼壁,使兩類細胞相互分離,操作方法與傳代相同。
細胞離體后,失去了神經體液的調節和細胞間的相互影響,生活在缺乏動態平衡相對穩定環境中,易發生如下變化:分化現象減弱;形態功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡;或發生轉化獲得不死性,變成可無限生長的連續細胞系或惡性細胞系。因此,培養中的細胞可視為一種在特定的條件下的細胞群體,它們既保持著與體內細胞相同的基本結構和功能,也有一些不同于體內細胞的性狀。實際上從細胞一旦被置于體外培養后,這種差異就開始發生了。

(1)待細胞生長達一定數量后,倒出舊培養液,用*消化后,Hanks 沖洗2次,加入不含血清的培養液,吹打制成細胞懸液;

(2)取編號為此A、B、C三個培養瓶;首先把懸液接種入A培養瓶中。置溫箱中靜止培養5~20分鐘后,輕輕傾斜培養瓶,讓液體集中瓶角后慢慢吸出全部培養液,再接種入B培養瓶中后;向A瓶中補充少許*培養液置溫箱中繼續培養;

(3)培養B瓶中細胞5~20分鐘后,接處理A的方法,把培養液注入C培養瓶中;再向B瓶中補加*培養基。

當三個瓶內都含有ATCC細胞培養液后,均在溫箱中繼續培養。如操作成功,次日觀察可見A瓶主要為成纖維細胞,B瓶兩類細胞相雜,C瓶可能主要為癌細胞。必要時可反復處理多次,直至癌細胞純化為止。
對照品    α-對羥基苯*    30mg    對照品
對照品    *二醇物    50mg    對照品
對照品    *    200mg    對照品
標準試劑    乙酰苯胺    200    標準試劑
標準試劑    *酶    2ml    標準試劑
標準試劑    咪唑試劑    100g    標準試劑
標準試劑    對乙酰氨基苯甲醚    200mg    標準試劑
標準試劑    庚烷磺酸鈉    5g    標準試劑
標準試劑    3-乙氧基-4-羥基苯甲醛    100mg    標準試劑
標準試劑    2-苯乙酰胺    65mg    標準試劑
ATCC細胞

 

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