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人白細胞抗原B27(HLA-B27)試劑盒實驗原理

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人白細胞抗原B27(HLA-B27)試劑盒實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人白細胞抗原B27(HLA-B27)水平。用純化的人白細胞B27(HLA-B27)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細胞抗原B27(HLA-B27),再與HRP標記的白細胞B27(HLA-B27)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞抗原B27(HLA-B27)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人白細胞抗原B27(HLA-B27)濃度。

操作總程序:

計算以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與  OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

人白細胞抗原B27(HLA-B27)試劑盒注意事項

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未

用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有

析出,稀釋時可在浴中加溫助溶,洗滌時不影響。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間

控制在 5分鐘內,如標本數量多,*使用排槍加樣。

4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本  OD值

大于標準品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計

算時請Z后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行試驗。

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

人白細胞抗原B27(HLA-B27)試劑盒保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6個月

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