低聚半乳糖(Galactooligosaccharides，GOS)是一種具有天然屬性的功能性低聚糖，其分子結(jié)構(gòu)一般是在半乳糖或葡萄糖分子上連接1~7 個半乳糖基，即Gal-(Gal)n-Glc/Gal(n 為0-6)。
低聚半乳糖是人體腸道中雙歧桿菌、嗜酸乳酸桿菌等有益菌的營養(yǎng)源和增殖因子，可以改善人體腸道的消化吸收功能。新生兒的消化功能比較薄弱，所以嬰幼兒奶粉中都添加了低聚半乳糖的營養(yǎng)成分，不但能改善寶寶的消化功能，還能促進(jìn)寶寶體內(nèi)鈣的吸收，從而增強(qiáng)寶寶免疫力。
中華人民共和國衛(wèi)生部2008年第20號公告批準(zhǔn)低聚半乳糖為新資源食品，作為一種新的功能性食品，低聚半乳糖在我國將具有廣闊的市場前景。因此，關(guān)于低聚半乳糖的檢測需求也持續(xù)增長。
低聚半乳糖極性強(qiáng)，并且是不同聚合度糖的混合物，這對色譜柱的保留和分離能力提出了挑戰(zhàn)，常規(guī)色譜柱一般難以實現(xiàn)；此外，低聚半乳糖無紫外吸收，示差檢測器可進(jìn)行測定，但靈敏度不高，因此對低聚半乳糖的高靈敏度檢測也是面臨的另一個難題。
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低聚半乳糖原料的測定
Determination of galactooligosaccharide
raw materials
2022年6月30日發(fā)布食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)《食品營養(yǎng)強(qiáng)化劑 低聚半乳糖》，此標(biāo)準(zhǔn)2022年12月30日實施。標(biāo)準(zhǔn)中對于低聚半乳糖含量的測定規(guī)定了兩種檢測方法，高效液相色譜雙柱法和高效離子交換色譜法，其中離子色譜法為仲裁法。
△Dionex™ ICS-6000多功能高壓離子色譜儀
FANG FA GAI SHU
方 法 概 述
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采用磷酸鹽緩沖液提取試樣中游離的低聚半乳糖和乳糖，采用半乳糖苷酶將提取液中低聚半乳糖和乳糖酶解，將提取的初始溶液和酶處理過的溶液分別用離子色譜儀測定。第一步測定初始溶液中游離的半乳糖和乳糖，第二步測定從低聚半乳糖和乳糖中釋放出來的半乳糖總量。利用乳糖和半乳糖的含量計算試樣中低聚半乳糖的含量。
LI ZI SE PU TIAO JIAN
離 子 色 譜 條 件
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由于前處理使用半乳糖苷酶將低聚半乳糖酶解為半乳糖和葡萄糖，因此采用對單雙糖具有優(yōu)秀分離能力的CarboPac PA20糖分析色譜柱，氫氧化鈉和醋酸鈉水溶液梯度洗脫，脈沖安培檢測器，進(jìn)樣量20μL，柱溫30℃，流速0.4 mL/min，金工作電極，Ag/AgCl參比電極，糖標(biāo)準(zhǔn)四電位波形進(jìn)行測定。離子色譜法對常見單雙糖的分離效果如圖2所示。僅需5~25 μL小體積進(jìn)樣即可檢測ng/L~mg/L級別單雙糖，無需衍生化，靈敏度高。
△IC-PAD測定常見單雙糖（點擊查看大圖）
1-巖藻糖；2-鼠李糖；3-阿拉伯糖；4-半乳糖；5-葡萄糖；6-蔗糖；7-木糖；8-果糖；9-乳糖
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乳粉中的低聚半乳糖
Galacto-oligosaccharides in milk powder
嬰幼兒奶粉中都添加了低聚半乳糖的營養(yǎng)成分，因此是奶粉中的必檢項目。關(guān)于奶粉中低聚半乳糖的測定目前尚無國家標(biāo)準(zhǔn)出臺。
賽默飛自主研發(fā)建立使用低聚半乳糖原料為對照品直接測定奶粉中低聚半乳糖的方法。利用不受奶粉本底干擾的色譜峰來定性定量，不受樣品中高含量乳糖的干擾，可準(zhǔn)確測定嬰幼兒奶粉中的低聚半乳糖。此方法無需酶解，降低成本，但對色譜柱分離能力和檢測器靈敏度要求較高，賽默飛ICS-6000高壓離子色譜儀，配置脈沖安培檢測器和Carbopac PA20色譜柱，可wan全滿足高靈敏度和分離度的要求。
△IC-PAD測定不同廠家的低聚半乳糖譜圖（點擊查看大圖）
#采用離子色譜法（IC）進(jìn)行低聚半乳糖的檢測具有多種優(yōu)勢：
1.專用糖分析色譜柱對糖類物質(zhì)具有良好的保留和分離效果；
2.脈沖安培檢測器（PAD）對糖類物質(zhì)具有特異性響應(yīng)和高靈敏度；
3.無需衍生即可直接檢測，重復(fù)性好；
4.單雙糖、低聚糖、多聚糖、糖醇、氨基糖、酸性糖均可進(jìn)行檢測。
離子色譜測定糖類物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)方法和推薦色譜柱持續(xù)更新中?。?！
（△點擊查看大圖）
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