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海洋微生物菌種檢測原理

時間:2017/9/18閱讀:327
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海洋微生物菌種檢測原理
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預先包被人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)多克隆抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)濃度呈正相關,450nm波長下測定OD值,根據標準品和樣品的OD值,計算樣本中人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)含量。
操作步驟
1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標準品和待測樣本:取足夠數量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加*40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。
7、溫育:重復4的操作。
8、洗板:重復5的操作。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。
10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。
11、測定:以空白孔調零,在終止后15分鐘內,用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
12、計算:根據標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。
海洋微生物菌種人抗肌動蛋白抗體(AAA)免疫試劑盒    Human anti-Actin antibody,AAA ELISA Kit
人抗黃體生成素抗體(Anti LH Ab)免疫試劑盒    Human Anti LH Ab ELISA Kit
人抗環胍氨酸肽(CCP)抗體免疫試劑盒    Human anti-CCP antibody ELISA Kit
人抗琥珀酸脫氫酶黃素亞單位抗體(IgG)免疫試劑盒    Human anti-succinate dehydrogenase complex subunit A flavoprotein antibody(IgG)ELISA Kit
人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV IgM)免疫試劑盒    Human Anti-Respiratory Syncytial Virus Antibody IgM,RSV-IgM ELISA Kit
人抗呼吸道合胞病毒(RSV)抗體免疫試劑盒    Human anti-respiratory syncytial virus(RSV)antibody ELISA Kit
人抗呼吸道合胞病毒(RSV)抗體(IgG)免疫試劑盒    Human anti respiratory syncytial virus(RSV)antibody(IgG)ELISA kit
人抗紅細胞抗體(RBC)免疫試劑盒    Human anti-red cell antibody ELISA Kit
人抗核周因子(APF)抗體免疫試劑盒    Human anti-perinuclear factor(APF)antibody ELISA Kit
人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)免疫試劑盒    human anti-nucleosome antibody IgG,AnuA-IgG ELISA Kit
人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)免疫試劑盒    Human anti-ribosomal P protein antibody,ARPA/Rib-P ELISA Kit
人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)免疫試劑盒    Human anti-ribonucleo protein Antibody,RNP-Ab ELISA Kit
人抗核仁抗體(ANA)免疫試劑盒    Human anti-nucleolus antibody,ANA ELISA Kit
人抗核抗體(ANA)免疫試劑盒    Human Anti-nuclear Antibody,ANA ELISA Kit
人抗骨骼肌抗體(ASA)免疫試劑盒    Human Anti-Somatic Muscle Antibody,ASA ELISA Kit
人抗弓形體(tox)抗體(IgM)免疫試劑盒    Human anti-toxoplasma(tox)antibody(IgM)ELISA kit
人抗弓形體(tox)抗體(IgG)免疫試劑盒    Human anti-toxoplasma(tox)antibody(IgG)ELISA Kit
人抗肝細胞膜抗體(LMA)免疫試劑盒    Human anti-liver cell membrane antibody,LMA ELISA Kit
人抗肝細胞胞質1型抗體(LC1)免疫試劑盒    Human anti-liver cytosolantibody type 1,LC1 ELISA Kit海洋微生物菌種

 

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