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海洋微生物菌種制備方法步驟

時間:2018/3/23閱讀:260
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海洋微生物菌種制備方法步驟
(1)秋水仙素處理:取骨髓前3h先給小鼠腹腔注入秋水仙素,注射劑量為100μg/kg動物體重。
(2)取骨髓:用損傷脊髓法處死小鼠,然后用剪刀剪開大腿上的皮膚和肌肉,取出大腿骨,用一小塊紗布搓干凈附在骨上的肌肉碎渣。剪掉股骨兩端膨大的關節頭,然后用注射器吸取5ml 0.85%生理鹽水,插入股骨一端,將骨髓細胞沖洗至10ml的離心管中。可重復沖洗多次,直至骨髓腔呈白色為止。
(3)低滲處理:將所獲得的細胞懸浮液以 1000rpm離心10min,吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加0.075mol/L KCL 溶液(37℃)至8ml刻度,將細胞沉淀物吹散打勻,在37℃水浴低滲25min。
(4)固定:低滲處理后,立即加入1ml新配制且預冷的固定液,抽打均勻,然后1000 rpm離心10min,棄上清。沿管壁加固定液至6ml, 吹散細胞后靜止固定10min,即*次固定。按上述條件離心,去上清液,再次加入固定液至6ml,進行第二次固定。10min后離心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,再往沉淀物中滴加4滴固定液,沖勻制成細胞懸液。
(5)滴片:取事先在冰箱中預冷的載玻片,從約15cm高處向每個載玻片上滴1~2滴細胞懸液于粘有冰水的載玻片上,晾干。
(6)染色:取制片平放在玻璃板上,用1∶9 Giemsa染液染色20min,流水沖洗后晾干。
(7)觀察:小白鼠染色體的形態特征,并計算2n的染色體數目。
海洋微生物菌種白介素1η(IL1η)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL1η ELISA Kit
白介素1ζ(IL1ζ)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL1ζ ELISA Kit
白介素1ε(IL1ε)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL1ε ELISA Kit
白介素1δ(FIL1δ)ELISA試劑盒    ,英文名:    FIL1δ ELISA Kit
白介素1β(IL1β)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL1β ELISA Kit
白介素1α(IL1α)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL1α ELISA Kit
白介素19(IL19)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL19 ELISA Kit
白介素18受體輔助蛋白(IL18RAP)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL18RAP ELISA Kit
白介素18受體1(IL18R1)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL18R1 ELISA Kit
白介素18結合蛋白(IL18BP)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL18BP ELISA Kit
白介素18(IL18)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL18 ELISA Kit
白介素17受體A(IL17RA)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL17RA ELISA Kit
白介素17F(IL17F)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL17F ELISA Kit
白介素17D(IL17D)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL17D ELISA Kit
白介素17C(IL17C)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL17C ELISA Kit
白介素17(IL17)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL17 ELISA Kit
白介素16(IL16)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL16 ELISA Kit
白介素15(IL15)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL15 ELISA Kit
白介素13(IL13)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL13 ELISA Kit
白介素12受體β2(IL2Rβ2)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL2Rβ2 ELISA Kit
白介素12B(IL12B)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL12B ELISA Kit
白介素12A(IL12A)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL12A ELISA Kit
白介素12(IL12)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL12 ELISA Kit
白介素11受體α(IL11Rα)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL11Rα ELISA Kit
白介素11(IL11)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL11 ELISA Kit
白介素10受體α(IL10Rα)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL10Rα ELISA Kit
白介素10(IL10)ELISA試劑盒    ,英文名:    IL10 ELISA Kit
白喉素合酶(DPH5)ELISA試劑盒    ,英文名:    DPH5 ELISA Kit
巴特蛋白(BART)ELISA試劑盒    ,英文名:    BART ELISA Kit海洋微生物菌種

 

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