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慢病毒感染細胞,為什么你的效率那么低

時間:2019/7/12閱讀:1053
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                     慢病毒感染細胞,為什么你的效率那么低

   那綠色讓人看了神清氣爽。一陣涼爽的風輕輕拂來,葉子“沙拉沙拉”地奏起了*的樂曲,伴著小鳥興奮而快樂的“嘰啾”聲,形成了一首美妙的自然交響樂。現在為你介紹   慢病毒不但可感染分裂或非分裂細胞,還可將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而實現持久表達,又很少引發機體免疫反應。被譽為「細胞實驗首.xuan、體內實驗*」工具病毒。

并且作為基因載體在治療各類遺傳性和后天性的人類疾病中倍受歡迎:從基礎研究發展到臨床階段,高濃度、高感染效率的慢病毒都是感染細胞表達(或沉默)目的基因的理想分子工具。

那么慢病毒在感染細胞中有什么優良表現呢?

慢病毒感染細胞的步驟一般是這個樣子的,以「24 孔培養板、貼壁細胞」為例:

Day0: 接種細胞

每孔按 5×104 個待感染細胞鋪板,用含有 10% FBS 的 DMEM 培養基培養;

Day1: 細胞感染

感染前,根據說明書用*培養基配置感染液,備用吸掉舊培養基,更換為感染液; 并參考細胞 MOI 值,計算病毒使用量,加入病毒進行感染,混勻;

Day2 

病毒感染 8~16 h 后,換回常規培養基,繼續培養;

Day3~4: 確認感染效果

感染 72 h 后,顯微鏡下觀察感染效果,如 EGFP、Cherry 的表達情況;

如果都這么簡單的話,那你真的是 too young too simple! 

那么在慢病毒感染細胞過程中,到底會遇到哪些問題呢?此貼統統幫您搞定~~

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