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生物菌種實驗條件簡介

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生物菌種實驗條件簡介
在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質包被的*適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值而蛋白量*少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
生物菌種人巢蛋白1(NID1)ELISA Kit    英文名:    Human Nidogen 1,NID1 ELISA Kit
人超敏熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA Kit    英文名:    Human Ultra Sensitive Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit
人超敏熱休克蛋白60(HSP-60)ELISA Kit    英文名:    Human Ultra Sensitive Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit
人超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA Kit    英文名:    Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit
人超磷酸化微管相關蛋白tau(hyper phosphorylated MAPT)ELISA Kit    英文名:    Human hyper phosphorylated MAPT ELISA kit
人腸道病毒71型(EV71)抗體(IgM)ELISA Kit    英文名:    Human enterovirus 71 virus(EV71)antibody(gM)ELISA kit
人層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)ELISA Kit    英文名:    Human LAMC2 ELISA Kit
人層粘連蛋白β1(LN-β1)ELISA Kit    英文名:    Human Laminin β1,LN-β1 ELISA Kit
人層粘連蛋白-5(LN-5)ELISA Kit    英文名:    Human Laminin-5,LN-5 ELISA Kit
人布盧姆綜合征蛋白(BLM)ELISA Kit    英文名:    Human BLM ELISA Kit
人補體因子I(CFI)ELISA Kit    英文名:    Human CFI ELISA Kit
人補體因子H相關蛋白1(CFHR1)ELISA Kit    英文名:    Human CFHR1 ELISA Kit
人補體因子H(CFH)ELISA Kit    英文名:    Human CFH ELISA Kit
人補體因子B前體(pre-CFB)ELISA Kit    英文名:    Human complement factor B precursor,pre-CFB ELISA Kit
人補體片段4d(C4d)ELISA Kit    英文名:    Human Complement Fragment 4d,C4d ELISA Kit
人補體片段3d(C3d)ELISA Kit    英文名:    Human Complement Fragment 3d,C3d ELISA Kit
人補體片段3b受體(C3bR)ELISA Kit    英文名:    Human C3bR ELISA Kit
人補體蛋白9(C9)ELISA Kit    英文名:    Human C9 ELISA Kit
人補體蛋白5(C5)ELISA Kit    英文名:    Human Complement 5,C5 ELISA Kit
人補體C1q腫瘤壞死因子相關蛋白1(C1QTNF1/CTRP1)ELISA Kit    英文名:    Human C1QTNF1 ELISA Kit
人補體1抑制物抗體-IgM(C1INH-IgM)ELISA Kit    英文名:    Human Complement 1 inhibitor autoantibody-IgM,C1INH-IgM ELISA Kit
人補體1抑制物抗體-IgG(C1INH-IgG)ELISA Kit    英文名:    Human Complement 1 inhibitor autoantibody-IgG,C1INH-IgG ELISA Kit
人玻連蛋白(VTN)ELISA Kit    英文名:    Human vitronectin ELISA Kit
人并殖吸蟲抗體(IgM)ELISA Kit    英文名:    Human Anti-Paragonimus antibody IgM ELISA kit
生物菌種

 

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