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更新時間:2017-09-07 11:40:37瀏覽次數:99次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞;HEC-1-B-Cas9-590培養(yǎng)質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞;HEC-1-B-Cas9-590培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Puromycin,經2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;2ug/ml Puromycin
傳代方法 消化3-5分鐘;1:2傳代;3天內可長滿。
傳代情況 C3
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,12;D12S391:18,19;D13S317:11,11;D16S539:11,12;D18S51:16,20;D19S433:13,13;D21S11:30,31;D2S1338:18,19;D3S1358:15,15;D5S818:11,13;D6S1043:12,18;D7S820:9,11;D8S1179:13,14;FGA:21,21;Penta E:11,11;TH01:6,7;TPOX:8,11;vWA:18,18;
同工酶
染色體
使用權限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞;HEC-1-B-Cas9-590培養(yǎng)細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
NTRK1 Others Rat 大鼠 TrkA / NTRK1 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形細胞)5×106cells/瓶×2
人淋巴內皮細胞裂解物HLECL
A2780/Taxol細胞,人卵巢癌*耐藥株 鼠腹水單核細胞瘤,J774A.1細胞 前列腺癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml
Caki-2(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2
HBdSMC Pellet 人膀胱平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人腦膜細胞cDNAHMC cDNA
人間充質干細胞-脂肪 Human
CM-M090小鼠前脂肪細胞*培養(yǎng)基100mL
人角膜上皮細胞 (HcorF)( 5×105 )
小鼠腦瘤細胞;BC3H1 小鼠氣管和支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3
RLN1 Others Human 人 RLN1 / Relaxin-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠前胃癌細胞;MFC
人海馬星形膠質細胞(HA-h)(1×106)
SK-N-SH, 人神經母細胞瘤細胞
人惡性黑色素瘤細胞;A-375 [A375] 大鼠膀胱平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
M1 小鼠白血病細胞
KIT Others Human 人 c-KIT / CD117 人細胞裂解液 (陽性對照)
BrilliantGreenAgarw/Sulfadi
ISPMedium
改良BPLS瓊脂 BPLS Agar,Modified 250 用于各種標本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標準)
Dey/Engley中和肉湯基礎250g/瓶用于化妝品樣品的制備和衛(wèi)生環(huán)境中細菌的培養(yǎng),每升培養(yǎng)基中需添加0204incubationmediaDey/Engley中和肉湯基礎250g/瓶用于化妝品樣品的制備和衛(wèi)生環(huán)境中細菌的培養(yǎng),每升培養(yǎng)基中需添加0204
HektoenEntericAgar
鐵瓊脂250g用于產硫化氫細菌計數
26050-088 500ml incubation media 26050-088 500ml
聚多曲霉(薩氏曲霉) 質控菌株,對苯唑西林敏感,藥敏試驗 支/瓶
StuartTransportMedium
四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基(TTB) 250g 用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞;HEC-1-B-Cas9-590培養(yǎng)液體沙氏培養(yǎng)基250g用于真菌和酵母菌增菌
SSDC培養(yǎng)基(ISO) SSDC Medium 用于小腸結腸耶爾森氏菌的分離培養(yǎng)
平板計數瓊脂 PCA 250克 食品細菌總數測定和平板計數
煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)用于大腸菌群、大腸桿菌的測定(SN標準)incubationmedia煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)用于大腸菌群、大腸桿菌的測定(SN標準)
葡萄球菌增菌肉湯 250g 用于凝固酶陽性葡萄球菌的選擇性增菌
Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內膜腺癌細胞;HEC-1-B-Cas9-590培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉讓及使用細胞的時候要遵守國內外有關的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當的安全和處理措施盡量降低對健康或環(huán)境的危害。
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