Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-571品牌培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細(xì)胞及其子代，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2）公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對實驗細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準(zhǔn)確性。
3）從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實，僅供參考。
4）使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任，采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。

細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-571品牌
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使EC109細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:3傳代；2~3天1次。　
傳代情況  C3
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養(yǎng)法（-）　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,10；D12S391：19,20；D13S317：11,11；D16S539：12,12；D18S51：12,16；D19S433：13,13；D21S11：30,30；D2S1338：17,20；D3S1358：17,17；D5S818：12,12；D6S1043：13,13；D7S820：8,12；D8S1179：13,14；；FGA：25,25；Penta E：16,16；TH01：9,9；TPOX：8,8；vWA：16,17；
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-571品牌細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
IFNB1 Others Human 人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0154MDCK(犬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HHSECL

小香豬皮膚細(xì)胞;SSC-S2 組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞，U-937細(xì)胞 NUTU-19細(xì)胞，大鼠卵巢癌細(xì)胞株

SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19

HA Others H1N3 甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 Mouse

CM-R048大鼠腸巨噬細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人卵巢成纖維細(xì)胞(HOF) ( 5×105 )

小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16 小鼠肝實質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;HuT 78

ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM2 / CD102 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9402

人齒根膜韌帶成纖維細(xì)胞(HPDLF)( 5×105 )

CL-0406NCI-H838(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M-2B4 大鼠滑膜細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

CT-26 WT 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Xinjiang/1/2006) HA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
0.lliantgreen

固氮菌用阿須貝氏培養(yǎng)基 250g 用于固氮菌的分離培養(yǎng)

布氏瓊脂 Brucella Agar 250 用于彎曲桿菌分離(SN標(biāo)準(zhǔn))

SCDLP液體培養(yǎng)基250g/瓶用于化妝品樣品的增菌，每升培養(yǎng)基中需添加0ncubationmediaSCDLP液體培養(yǎng)基250g/瓶用于化妝品樣品的增菌，每升培養(yǎng)基中需添加0107

孟加拉紅培養(yǎng)基平板(9cm) 10個/包 用于食品中霉菌及酵母菌總數(shù)測定
半固體瓊脂26050250g供細(xì)菌動力觀察、菌種保存，H抗原位相變異試驗等。(美國FDA、SN、GB)

4101-prf EpiCM-prf 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 4101-prf EpiCM-prf 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml

胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB) 300ml/袋*10 用于藥品抑菌劑效力檢測中細(xì)菌檢測

6.5%NaCl葡萄糖瓊脂250g用于腸球菌高鹽耐受生長試驗

NTMMedium
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-571品牌厭氧菌瓊脂250g用于厭氧菌的分離培養(yǎng)

緩沖蛋白胨水 Buffered Peptone Water 用于阪崎桿菌前增菌培養(yǎng)(GB2008標(biāo)準(zhǔn))

肌醇測定培養(yǎng)基 Inositol Assay Broth 250 用于嬰幼兒配方食品和乳粉中肌醇測定

營養(yǎng)鹽瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于抗菌性能試驗，每升培養(yǎng)基中添加0.5g吐溫-80incubationmedia營養(yǎng)鹽瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于抗菌性能試驗，每升培養(yǎng)基中添加0.5g吐溫-80

Psychrophilicbacteriacountagar

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-571品牌質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。