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elisa定量檢測試劑盒實驗操作

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elisa定量檢測試劑盒實驗操作
3.1 樣品的稀釋樣品稀釋是ELISA實驗過程中操作影響zui大的部分之一,因為樣品稀釋大多是手工操作完成。 不同的檢測原理使用的血清濃度有差異, 血清稀釋倍數從1:1到1:200不等。阻斷法一般使用的血清濃度比較高, 其次是夾心法, 間接法使用的血清濃度比較低。血清稀釋首先是采用正確的稀釋倍數和使用正確的樣品稀釋液, 另外還要注意混勻和防止不同樣品質檢交叉污染。如果樣品量比較大可以使用稀釋版進行稀釋, 如果稀釋倍數比較高可以采用分步稀釋的方法。 避免進行長時間的孔內稀釋,因為這樣會造成前后樣品反應時間的差異, 影響到板內的均一性。
3.2 樣品或液體的添加樣品或液體的添加其實就是將液體從樣品管、 稀釋板或加樣槽中轉移到包被板中。這一步操作關鍵是正確及規范正確使用移液器, 需要注意的是在將液體加至包被板的微孔中時避免產生氣泡或將液體加在管壁上部,另外在添加液體后避免用微旋振蕩器進行混勻, 此細節針對不同工藝的產品會產生不同程度的影響。
3.3 孵育孵育就是抗原抗體反應的過程。 不同的產品所設計的孵育溫度有25℃、 37℃等,孵育時間有10、 15、 30、 60分鐘等。 首先是要確保孵育的溫度和時間正確無誤,另外需要注意的是, 孵育時防止微孔板被的液體蒸發產生濃縮效果, 使整個實驗本底升高,為了避免這個問題通常采用濕盒或封板膜。 另外就是需要考慮孵育時包被板內的液體受熱的時間、 速度及均一度。
3.4 洗板液的主要成分是表面活性劑, 其主要的作用是洗掉沒有參與反應的或非特異性結合的物質。洗板也是ELISA實驗操作中影響比較大的一步,但是現在大多使用洗板機, 其認為操作帶來的影響就大大減小。 如果采用手工洗板方法需要注意以下幾點:洗滌液的稀釋倍數及稀釋所使用的溶劑, 添加洗滌液的體積, 浸泡時間和洗板次數。每一個因素都會直接影響到試劑的性能。
3.5 終止反應終止液的成份主要取決于酶及底物的成份, 常用的終止液有氫氧化鈉、氟化氫或硫酸, 這些液體都具有很強的腐蝕性, 使用時要注意安全,如果濺到眼睛或皮膚需要及時處理。 在實驗過程中要在正確的時間進行終止, 終止之后孔內液體的顏色相對比較穩定,但是也會緩慢的變化, 有時候孔內會緩慢產生沉淀同時孔內顏色變淺, 需要及時進行讀值。
elisa定量檢測試劑盒綿羊結合珠蛋白/觸珠蛋白(HP)ELISA Kit    英文名:    Sheep haptoglobin,HP ELISA kit
綿羊窖蛋白Caveolin-1(CAV1)ELISA Kit    英文名:    Sheep Caveolin-1,CAV1 ELISA kit
綿羊甲狀腺素(T4)ELISA Kit    英文名:    Sheep thyroxine(T4)ELISA kit
綿羊基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP9/Gelatinase B)ELISA Kit    英文名:    Sheep matrix metallopeptidase 9,MMP9 ELISA kit
綿羊基質金屬蛋白酶3(MMP3)ELISA Kit    英文名:    Sheep matrix metallopeptidase 3(stromelysin 1,progelatinase)(MMP3)ELISA kit
綿羊基質金屬蛋白酶1(MMP1)ELISA Kit    英文名:    Sheep matrix metallopeptidase 1(interstitial collagenase)(MMP1)ELISA kit
綿羊饑餓激素(GHRL)ELISA Kit    英文名:    Sheep ghrelin/obestatin prepropeptide,GHRL ELISA kit
綿羊黃體生成素(LH)ELISA Kit    英文名:    Sheep Luteinizing Hormone,LH ELISA Kit
綿羊*(cAMP)ELISA Kit    英文名:    Sheep cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
綿羊環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA Kit    英文名:    Sheep cyclic Guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
綿羊花生四烯酸(AA)ELISA Kit    英文名:    Sheep arachidonic Acid,AA ELISA kit
綿羊骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA Kit    英文名:    Sheep Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit
綿羊睪酮(T)ELISA Kit    英文名:    Sheep Testosterone(T)ELISA kit
綿羊甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)ELISA Kit    英文名:    Sheep Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH ELISA kit
綿羊肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)ELISA Kit    英文名:    Sheep pulmonary surfactant-associated protein C,SP-C ELISA Kit
綿羊肺表面活性物質相關蛋白B(SP-B)ELISA Kit    英文名:    Sheep pulmonary surfactant-associated protein B,SP-B ELISA Kit
綿羊非酯化脂肪酸(NEFA)ELISA Kit    英文名:    Sheep non-ester fatty acid,NEFA ELISA kit
綿羊二醇受體(ER-Alpha)ELISA Kit    英文名:    Sheep Estradiol Receptor Alpha,ER-Alpha ELISA Kit
綿羊彈性蛋白酶2,中性粒細胞(ELA2)ELISA Kit    英文名:    Sheep elastase 2,neutrophil(ELA2)ELISA kit
綿羊催產素(OT)ELISA Kit    英文名:    Sheep oxytocin,OT ELISA Kit
綿羊雌二醇(E2)ELISA Kit    英文名:    Sheep Estradiol,E2 ELISA Kit
綿羊成纖維細胞生長因子23(FGF23)ELISA Kit    英文名:    Sheep Fibroblast Growth Factor 23,FGF23 ELISA Kit
綿羊補體片段3a(C3a)ELISA Kit    英文名:    Sheep complement fragment 3a,C3a ELISA kit
綿羊白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA Kit    英文名:    Sheep Interleukin-8,IL-8 ELISA Kit
綿羊白介素6(IL-6)ELISA Kit    英文名:    Sheep Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit
綿羊白介素4(IL-4)ELISA Kit    英文名:    Sheep Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit
綿羊白介素1α(IL-1α)ELISA Kit    英文名:    Sheep Interleukin 1α,IL-1α ELISA Kit
elisa定量檢測試劑盒

 

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