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MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元培養(yǎng)

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品       牌

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-08-07 10:56:02瀏覽次數(shù):146次

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產(chǎn)地 進口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元培養(yǎng),冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產(chǎn)品名稱:MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元培養(yǎng)
英文名稱:MN-c,mousecortical neurons
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0023
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元培養(yǎng)的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元培養(yǎng)收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

人白介素1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human Interleukin 1β converting enzyme,ICE ELISA Kit
人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human integrin-linked kinase 1,ILK-1 ELISA Kit
人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase,CYP21B ELISA Kit
人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase,CYP21A ELISA Kit
人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT ELISA Kit
人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO ELISA Kit
人脾臟*激酶(Syk)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human spleen tyrosine kinase,Syk ELISA Kit
人*/*蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit
人白介素受體相關(guān)激酶(IRAK)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human interleukin receptor associated kinase,IRAK ELISA Kit
人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human phosphoenolpyruvate carboxykinase,PCK ELISA Kit 
人*(trypsin)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human trypsin ELISA Kit 
人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human β-site APP-Cleaving Enzyme 1,1BACE1 ELISA Kit
人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Protein disulfide-isomerase precursor,PDI ELISA Kit
人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human protein disulfide-isomerase A3,PDIA3 ELISA Kit
人*脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit
人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase,PPI ELISA Kit
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元培養(yǎng)人*氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human ornithine carbamoyl transferase,OCT ELISA Kit
人內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA Kit
人蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Protein Phosphatase,PP ELISA Kit
人硫氧還蛋白還原酶(TrxR)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human thioredoxin reductase,TrxR ELISA Kit
人天青殺素(AZU)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human azurocidin,AZU ELISA Kit
人血管緊張肽酶A(ATA)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human Angiotensinase A,ATA ELISA Kit
人胰*(PAMY)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human Pancreatic     
 

 

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