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HL-02 L-02HL-7702 正常人肝上皮細胞*

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更新時間:2017-08-07 13:29:06瀏覽次數(shù):207次

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產(chǎn)地 進口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
HL-02 [L-02HL-7702] 正常人肝上皮細胞*,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產(chǎn)品名稱:HL-02 [L-02HL-7702] 正常人肝上皮細胞*
英文名稱:HL-02 [L-02 HL-7702] a normal human liver epithelial cells
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0082
HL-02 [L-02HL-7702] 正常人肝上皮細胞*的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
HL-02 [L-02HL-7702] 正常人肝上皮細胞*培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

45-0    分子式:    C42H66O14    794.97    20mg
褪黑素    英文名稱:    Melatonine    :    73-31-4    分子式:    C13H16N2O2    232.28    20mg
11-酮基乳香酸    英文名稱:    beta-boswellic acid,11-keto    :    17019-92-0    分子式:    C30H46O4    470.68    10mg
甜菊醇    英文名稱:    Stevioside    :    471-80-7    分子式:    C20H30O3    318.45    20mg
藤黃酸(鑒別用)    英文名稱:    Gambogic acid    :     2752-65-0     分子式:    C38H44O8    628.75    20mg
新藤黃酸    英文名稱:    Neogambogic acid    :        分子式:    C38H46O9    646.772    20mg
甜橙黃酮    英文名稱:    Sinensetin    :    2306-27-6    分子式:    C20H20O7    372.37    20mg
太子參環(huán)肽B    英文名稱:    Heterophyllin B    :        分子式:            10mg
苔黑酚葡萄糖苷(97%)    英文名稱:    Orcinolglucoside    :        分子式:    C13H18O7    286.28    20mg
檀香醇    英文名稱:    Santalol    :    11031-45-1    分子式:    C15H24O    220.35    20mg
拓撲替康    英文名稱:    Topotecan    :    123948-87-8    分子式:    C23H23N3O5    421.45    20mg
鹽酸拓撲替康    英文名稱:    Topotecan hydrochloride    :    119413-54-6    分子式:    C23H24ClN3O5    457.91    20mg
 安五脂素    英文名稱:     Anwuligan    :     107534-93-0    分子式:     C20H24O4    328.406    20mg
五味子甲素    英文名稱:    Schisandrin A    :    61281-38-7    分子式:    C22H28O6    388.45    20mg
五味子乙素    英文名稱:    Schisandrin B    :    61281-37-6    分子式:    C23H28O6    400.46    20mg
五味子醇甲    英文名稱:    Schisandrin    :    7432-28-2    分子式:    C24H32O7    432.51    20mg
五味子酯甲    英文名稱:    Schisantherin A    :    58546-56-8    分子式:    C30H32O9    536.574    20mg
五味子醇乙    英文名稱:    Schisandrol B    :    58546-54-6     分子式:    C23H28O7     416.47    20mg
五味子丙素    英文名稱:    Schisandrin C    :    61301-33-5?    分子式:    C22H24O6    384.42    20mg
戈米辛G    英文名稱:    Gomisin G    :         分子式:    C29H32O8     508.57    10mg
吳茱萸內(nèi)酯    英文名稱:    Evodine    :    6989-38-4    分子式:    C18H19NO5    329.35    20mg
吳茱萸新堿    英文名稱:    Evocarpine    :    15266-38-3    分子式:    C23H33NO     339.53    10mg
吳茱萸堿    英文名稱:    Evodiamine    :    518-17-2    分子式:    C19H17N3O    303.36    20mg
去氫吳茱萸堿    英文名稱:    Dehydroevodiamine    :    67909-49-3    分子式:    C19H15N3O        10mg
HL-02 [L-02HL-7702] 正常人肝上皮細胞*吳茱萸次堿    英文名稱:    Rutaecarpine    :    84-26-4    分子式:    C18H13N3O    287.32    20mg
*醇     英文名稱:    lindenenol    :    26146-27-0    分子式:            10mg
王不留行黃酮苷    英文名稱:    Vaccarin    :    53452-16-7    分子式:    C32H38O19    726.63    20mg

 

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