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人食管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基保存運(yùn)輸

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-08-07 15:51:16瀏覽次數(shù):171次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
人食管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基保存運(yùn)輸,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。

產(chǎn)品名稱:人食管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基保存運(yùn)輸
英文名稱:Human esophageal smooth muscle cell culture medium
規(guī)格:100mL
產(chǎn)品貨號(hào):FS-X0207
人食管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基保存運(yùn)輸的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
人食管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基保存運(yùn)輸培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號(hào)21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

*酶(歐文菌)    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    供*酶鑒別用    含量:    140733-200501    規(guī)格:    20mg/支
*    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    鑒別,有關(guān)物質(zhì)檢查    含量:    140734-200501    規(guī)格:    20mg/支
5'-胞苷酸    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    檢查    含量:    140735-200501    規(guī)格:    20mg/支
4'-羥基苯乙酸    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    鑒別及含量測定    含量:    140736-200501    規(guī)格:    20mg/支
5'-羥基吲哚乙酸    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    HPLC法含量測定    含量:    140737-200501    規(guī)格:    20mg/支
馬尿酸    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    HPLC法含量測定    含量:    140738-200501    規(guī)格:    20mg/支
苯乙酰*    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    HPLC法含量測定    含量:    140739-200501    規(guī)格:    20mg/支
氧化型*    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    檢查    含量:    140746-200801    規(guī)格:    20mg/支
*    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    鑒別    含量:    140747-201001    規(guī)格:    20mg/支
**    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    HPLC法含量測定    含量:    140749-200701    規(guī)格:    20mg/支
*    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    HPLC法含量測定    含量:    140750-200701    規(guī)格:    20mg/支
*    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    鑒別    含量:    140751-200701    規(guī)格:    20mg/支
角鯊?fù)?nbsp;   進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    內(nèi)標(biāo)物    含量:    140752-200601    規(guī)格:    20mg/支
戈瑞林    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    HPLC法含量測定    含量:    140754-200701    規(guī)格:    20mg/支
*鎂    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    鑒別    含量:    140756-200801    規(guī)格:    20mg/支
*鉀    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    鑒別    含量:    140757-200801    規(guī)格:    20mg/支
*    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    檢查    含量:    140770-200701    規(guī)格:    20mg/支
L -肌肽    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    供*    含量:    140771-201001    規(guī)格:    20mg/支
*    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    供*    含量:    140772-201001    規(guī)格:    20mg/支
醋酸*    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    供氨基酸鑒別    含量:    140781-200801    規(guī)格:    20mg/支
*    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    供*    含量:    140784-201001    規(guī)格:    20mg/支
β-*    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    檢查用    含量:    140783-200801    規(guī)格:    20mg/支
*    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    供2010版    含量:    140785-201001    規(guī)格:    20mg/支
*    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    供鑒別與有關(guān)物質(zhì)系統(tǒng)適用性    含量:    140787-201001    規(guī)格:    20mg/支
人食管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基保存運(yùn)輸前列腺素A1    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    供*    含量:    140790-200801    規(guī)格:    20mg/支
前列腺素B1    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    供*    含量:    140791-200801    規(guī)格:    20mg/支
N-乙酰-半*1-*    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    供*    含量:    140793-201001    規(guī)格:    20mg/支

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