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大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基保存運輸

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更新時間:2017-08-08 14:56:55瀏覽次數(shù):141次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基保存運輸,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產(chǎn)品名稱:大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基保存運輸
英文名稱:Rat hepatic artery endothelial cell culture medium
規(guī)格:100mL
產(chǎn)品貨號:FS-X0345
大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基保存運輸的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基保存運輸收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

Saikosaponin B1    規(guī)格:    20mg/支
柴胡皂苷B2    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱        含量:    Saikosaponin B2    規(guī)格:    20mg/支
土貝母苷甲    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱        含量:    Tubeimoside I    規(guī)格:    20mg/支
牛蒡子苷    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    牛蒡苷    含量:    Arctiin    規(guī)格:    20mg/支
靛藍(lán)    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    靛蘭    含量:    Indigo    規(guī)格:    20mg/支
黃柏酮    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    奧巴叩酮    含量:    Obacunone    規(guī)格:    20mg/支
吳茱萸堿    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱        含量:    Evodiamine    規(guī)格:    20mg/支
吳茱萸次堿    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱        含量:    Rutaecarpine    規(guī)格:    20mg/支
松脂醇二葡萄糖苷    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    松酯醇二葡萄糖苷    含量:    Pinoresinol diglucoside    規(guī)格:    20mg/支
2,3,5,4-四羥基二苯乙烯葡萄糖苷    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    2,3,5,4-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷    含量:    2,3,5,4-tetrahydroxyl diphenylethylene-2-o-glucoside    規(guī)格:    20mg/支
貝母素甲    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    貝母甲素    含量:    Peimine    規(guī)格:    20mg/支
貝母素乙    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    貝母乙素    含量:    Peiminine    規(guī)格:    20mg/支
連翹苷    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱        含量:    Phillyrin    規(guī)格:    20mg/支
三七皂苷R1    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    三七皂甙R1    含量:    Notoginsenoside R1    規(guī)格:    20mg/支
酸棗仁皂苷A    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    酸棗仁皂甙A    含量:    Jujuboside A    規(guī)格:    20mg/支
酸棗仁皂苷B    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    酸棗仁皂甙B    含量:    Jujuboside B    規(guī)格:    20mg/支
酸棗仁皂苷D    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    酸棗仁皂甙D    含量:    Jujuboside D    規(guī)格:    20mg/支
白樺脂酸    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    白樺酯酸    含量:    Betulinic acid    規(guī)格:    20mg/支
升麻素苷    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    升麻苷    含量:    Prim-O-glucosylcimifugin    規(guī)格:    20mg/支
升麻素    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱        含量:    Cimifugin    規(guī)格:    20mg/支
大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基保存運輸類葉升麻苷    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    麥角甾苷;毛蕊花糖苷    含量:    Acteoside    規(guī)格:    20mg/支
異類葉升麻苷    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    異麥角甾苷;異毛蕊花糖苷    含量:    Isoacteoside    規(guī)格:    20mg/支
松果菊苷    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    海膽苷    含量:    Echinacoside    規(guī)格:    20mg/支
5-O-甲基維斯阿米醇苷    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱        含量:    5-O-Methylvisammioside    規(guī)格:    20mg/支
異土木香內(nèi)酯    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    異阿蘭內(nèi)酯    含量:    Isoalantolactone    規(guī)格:    20mg/支
鹽酸藥根堿    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱        含量:    

 

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