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小鼠皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基*

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-08-08 17:11:30瀏覽次數(shù):356次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
小鼠皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基*,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產(chǎn)品名稱:小鼠皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基*
英文名稱:Murine subcutaneous adipose cells in complete culture medium
規(guī)格:100mL
產(chǎn)品貨號:FS-X0518
小鼠皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基*的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。

小鼠皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基*培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

121309-    規(guī)格:    20mg/支
紫檀香    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121310-    規(guī)格:    20mg/支
絞股藍(lán)    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121311-200402    規(guī)格:    20mg/支
鳳尾草    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121312-200301    規(guī)格:    20mg/支
鐵筷子    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121313-200503    規(guī)格:    20mg/支
吉祥草    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121314-200402    規(guī)格:    20mg/支
地瓜藤    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121315-200502    規(guī)格:    20mg/支
白英    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121316-    規(guī)格:    20mg/支
苦菜子    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121317-200502    規(guī)格:    20mg/支
桃金娘根    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121318-200402    規(guī)格:    20mg/支
珠子草    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121319-200301    規(guī)格:    20mg/支
烏賊墨    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121320-200301    規(guī)格:    20mg/支
黃芫花    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121321-200301    規(guī)格:    20mg/支
荷葉    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121322-200402    規(guī)格:    20mg/支
蜂膠    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121324-200301    規(guī)格:    20mg/支
冬凌草    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121325-200301    規(guī)格:    20mg/支
腎茶    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121326-200502    規(guī)格:    20mg/支
金鐵鎖    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121327-200402    規(guī)格:    20mg/支
牛黃    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121328-200301    規(guī)格:    20mg/支
八角楓    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121329-    規(guī)格:    20mg/支
狼毒(狼毒大戟)    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121331-200402    規(guī)格:    20mg/支
小鼠皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基*塞隆骨    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121332-200502    規(guī)格:    20mg/支
廣棗    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121334-200401    規(guī)格:    20mg/支
鷓鴣菜    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121335-200401    規(guī)格:    20mg/支
膽木    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121336-    規(guī)格:    20mg/支

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