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免疫組織化學技術是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，對組織或細胞內抗原或抗體物質定性和定位的組織化學技術。 組織的非特異性染色的機理很復雜,所以控制非特異性背景染色也不容易, 非特異性染色的識別常出現在組織邊緣、膠原纖維及血漿滲出處，壞死組織及固定不良的組織中心處。表現為彌漫性，均勻性的背景染色。也可以是隨機分布的陽性反應產物點、團或塊狀。免疫組化非特異性染色的原因及避免方法有哪些呢？一起來學習一下吧！
1. 靜電吸附
抗體是一種帶負電荷的球蛋白，容易和帶正電荷的組織相結合。 在用第一抗體前加制備第二抗體動物之非免疫血清封閉組織上的帶電荷基團，從而除去與第一抗體的非特異性結合。如果還不可以的話可能蛋白質封閉不夠或所用血清溶血。
2. 內源性過氧化物酶
紅細胞，粒細胞的含量尤其高，鏡下可以識別，不要將其當成陽性結果。
石蠟切片 3%雙氧水-甲醇溶液處理切片；
3. 洗滌不che底
保證各步驟的PBS或TBS沖洗的時間和量，方法要得當，最好可以把切片放在裝滿洗液的染色盒內浸泡一段時間以確保充分清洗。有一些人鑒于實驗經費緊張，那吸管滴加標本上沖洗，這樣很難保證沖洗的干凈與否。這實際是千里之堤，潰于蟻穴。
4. DAB顯色反應時間過長
最好是在顯微鏡下時時觀察一避免顯色回見過長而引起的非特異性染色背景
5. 一抗稀釋液
可以在一抗稀釋液內適當添加1%BSA或合適濃度的二抗來源的血清。
以上就是有關于免疫組化非特異性染色的原因及避免方法有哪些的問題解答，如果你想了解更多請咨詢百奧創新客服哦~
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