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人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)Elisa試劑盒供應商

來源:上海博研生物工程研究中心   2013年09月23日 15:49  

人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)操作步驟

1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

12IU/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

6IU/L

4號標準品

150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋液

3IU/L

3號標準品

150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋液

1.5IU/L

2號標準品

150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋液

0.75IU/L

1號標準品

150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

 

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 

7. 溫育:操作同3

8. 洗滌:操作同5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月

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