目前上的移液器校準(zhǔn)方法是什么？

作者：乾蕓儀器科技

要回答這個(gè)問題，我們應(yīng)先了解下什么是移液器，其功能是什么，對它進(jìn)行校準(zhǔn)時(shí)，又有哪些因素會(huì)影響其校準(zhǔn)結(jié)果等問題。移液器顧名思義，是可以將一定量的液體從一個(gè)地方轉(zhuǎn)移到另一個(gè)地方的儀器。當(dāng)然，移液器不僅能夠?qū)崿F(xiàn)液體的轉(zhuǎn)移，還要能夠?qū)崿F(xiàn)對量的控制。因此移液器的校準(zhǔn)，便是對其基礎(chǔ)功能以及計(jì)量結(jié)果的檢驗(yàn)。移液器的液體轉(zhuǎn)移性能好壞可以通過目視觀察判斷；但其計(jì)量的結(jié)果則需借助一些特定的工具和方法才可以得到驗(yàn)證！ 

當(dāng)前針對移液器計(jì)量結(jié)果的檢測、驗(yàn)證，主流或主要的方法是采用衡量法！關(guān)于這一點(diǎn)，我們乾蕓儀器科技有限公司針對我們的客戶進(jìn)行過咨詢，絕大多數(shù)都是選擇這一方法——也被稱之為“稱重法”。之所以被通稱為“稱重法”是因?yàn)樵摲椒ǖ脑硎峭ㄟ^天平對移液器計(jì)量的一定容量的液體進(jìn)行稱重，并以此數(shù)據(jù)為依據(jù)從而推斷出移液器計(jì)量結(jié)果的實(shí)際值——即容量。從這一方法的原理顯然可以看出，“衡量法（或稱重法）“校準(zhǔn)過程極容易受到如下因素的影響。 

影響因數(shù)：

1 溫度，因?yàn)橐欢ㄙ|(zhì)量的液體的體積會(huì)受溫度的影響而改變的。因此一定質(zhì)量的液體，在不同的溫度下，其體積也是不同的,這就導(dǎo)致利用移液器計(jì)量一定容量的液體時(shí),會(huì)因?yàn)闇囟鹊纳?而導(dǎo)致天平讀數(shù)即質(zhì)量下降,從而據(jù)此結(jié)果推斷出的被轉(zhuǎn)移的液體的容量將小于實(shí)際容量; 

2 氣壓，在不同的大氣壓力下，相同質(zhì)量的液體其體積也是不同的，但通常這種差異非常輕微，甚至可以忽略； 

3 用于稱量的高精度電子天平的水平度、穩(wěn)定性以及被稱量物品放在電子天平托盤上的位置等，均會(huì)影響稱量結(jié)果（這一點(diǎn)在相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)如JJG646，ISO8655等中并沒有明確列出，但據(jù)我們乾蕓儀器科技有限公司多年的實(shí)際操作經(jīng)驗(yàn)表明，這些來自天平細(xì)微影響對微小容量的移液器校準(zhǔn)，還是應(yīng)該得到重視的）； 

4 操作人員的操作習(xí)慣帶來的影響； 

5 測量儀器如電子天平、溫度計(jì)等自身的誤差帶來的影響； 

6 環(huán)境的相對濕度對待校準(zhǔn)移液器的校準(zhǔn)結(jié)果帶來的影響； 

可見采用傳統(tǒng)的衡量法（稱重法）對移液器進(jìn)行校準(zhǔn)，將會(huì)受到來自環(huán)境、人員以及測量儀器、設(shè)備等多種因素的影響。為此很多移液器校準(zhǔn)或檢定實(shí)驗(yàn)室不得不從實(shí)驗(yàn)室整體設(shè)計(jì)上去避免、控制這些影響因素。如果實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)計(jì)、控制得當(dāng)，則可zui大限度地將上述因素帶來的影響降低。但同時(shí)將導(dǎo)致一個(gè)新的、實(shí)際的問題，即是在專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室里面獲得的結(jié)果數(shù)據(jù)是否適用于移液器的實(shí)際使用場所使用？我們乾蕓儀器科技有限公司曾經(jīng)做過類似測試，結(jié)果表明在專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室里得到的結(jié)果并不能*在終端用戶處得到復(fù)現(xiàn)！

因?yàn)榻K端用戶處的環(huán)境，是千差萬別的，有的甚至高于這些專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，但更多的則是遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于這些專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室。因此常常遇到在專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室里校準(zhǔn)合格的移液器，當(dāng)終端用戶在自己的工作場所重新校準(zhǔn)時(shí)，卻發(fā)現(xiàn)其結(jié)果并不理想。這不一定是移液器質(zhì)量出現(xiàn)問題，常常是因?yàn)樾?zhǔn)的場所的環(huán)境改變了、校準(zhǔn)的人員改變了，從而上述影響校準(zhǔn)結(jié)果的各種因素也改變了。而解決這一問題的zui有效的辦法就是直接去到終端用戶的實(shí)際使用場所去對用戶的移液器進(jìn)行校準(zhǔn)，這樣得到的校準(zhǔn)結(jié)果對特定的用戶來說才是zui真實(shí)的！ 

     我們當(dāng)然可以將專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室的儀器、設(shè)備，如高精度電子天平、專業(yè)技術(shù)人員、環(huán)境控制的等各種設(shè)備搬遷至終端用戶處進(jìn)行校準(zhǔn)，但這顯然是不經(jīng)濟(jì)的，也是行不通的。因?yàn)橛行﹥x器，比如高精度電子天平，一旦離開了原本固定的使用場所，是需要重新校準(zhǔn)合格才可以使用的。那么是否有另一辦法可以的、簡便的解決這個(gè)問題呢？這就是下文要與各位探討的一種全新的移液器校準(zhǔn)方法——分光光度法。

分光光度法校準(zhǔn)原理是將混合有特殊物質(zhì)的液體——即溶劑(英文solution)，通過移液器量取后注入目標(biāo)容器，然后通過使用特定的濾波片過濾掉一部分不需要的波長的光后，再對剩余的特定的波長的光進(jìn)行測量，從而由此計(jì)算出移液器實(shí)際吸取和排出的液體——即溶劑。由分光光度法校準(zhǔn)的原理可見，在采用分光光度法對移液器校準(zhǔn)的過程中，可能對校準(zhǔn)結(jié)果帶來影響的因素主要有：

1 溫度，因?yàn)榉止夤舛确ㄍ瑯有枰褂玫揭后w即溶劑，一定質(zhì)量量的溶劑，其容積同樣受到溫度的影響而變化。但如果在用戶所在的場所對移液器進(jìn)行校準(zhǔn)，則此影響可以不計(jì)，因?yàn)槟骋粋€(gè)具體用戶所在的場所內(nèi)的溫度變化，相對來說是固定的，那么這種由溫度帶來的影響，同樣也會(huì)存在于用戶實(shí)際工作中，因此這兩者是可以相互抵消的（乾蕓儀器科技有限公司備注：目前在該領(lǐng)域較為成熟的技術(shù)來自于美國一家實(shí)驗(yàn)室）；

2 氣壓，同溫度帶來的影響一樣，由氣壓帶來的影響也是可以相互抵消的；

3 操作人員的操作習(xí)慣帶來的影響，因?yàn)榉止夤舛确ㄊ强梢员恢苯釉诮K端用戶使用場所應(yīng)用的一種移液器校準(zhǔn)方法，其操作方法相對于傳統(tǒng)的衡量法（或稱重法）更為簡單、可靠，因此*可由移液器的使用者來直接對其使用的移液器采用分光光度法進(jìn)行校準(zhǔn)。這樣操作者的操作習(xí)慣在校準(zhǔn)過程中表現(xiàn)出來的差異同樣存在與今后的使用過程中，這兩者之間的差異也可以相互抵消的；

4 環(huán)境濕度，因?yàn)榉止夤舛确ú皇菍σ埔浩髋懦龅娜軇┻M(jìn)行稱量，而是對溶劑中所包含的特殊物質(zhì)的光波進(jìn)行測量，同時(shí)這種特殊物質(zhì)是不可揮發(fā)的，因此在整個(gè)測試過程中，其已經(jīng)通過移液器排出的溶劑，無論其質(zhì)量如何變化，但結(jié)果是不會(huì)受到影響的，也就是不需要對環(huán)境的干濕度進(jìn)行控制。

至此我們幾乎可以說，針對移液器采用分光光度發(fā)進(jìn)行校準(zhǔn)，其整個(gè)的測試過程是幾乎不受環(huán)境因素影響的，如溫度、氣壓、干濕度等，同時(shí)因在這一校準(zhǔn)過程中，校準(zhǔn)人和zui終使用人可以做到是同一人，從而因人的因素而帶來的差異也是降到zui低的。當(dāng)然這種方法也不確定因素，比如分光光度法設(shè)備及使用的試劑自身也必然存在一定的誤差，這與傳統(tǒng)的衡量法（或稱重法）里測量儀器自身的誤差一樣，比如電子天平自身的誤差、溫度計(jì)自身的誤差、干濕度計(jì)以及氣壓計(jì)自身的誤差等，但這些來自于測量設(shè)備、溶劑自身的誤差，通常是恒定的，并且是可以事先測量、估算的，可以通過的測量數(shù)據(jù)進(jìn)行修正的方法來避免的。

當(dāng)然，目前分光光度法作為一種針對移液器校準(zhǔn)的新的應(yīng)用方法還是剛剛興起，在國外也只有少數(shù)研究機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室在使用，在我國目前僅停留在理論層面的評估上，并沒有在實(shí)際中推廣、應(yīng)用。但因?yàn)榉止夤舛确ú皇墉h(huán)境因素干擾，且設(shè)備攜帶方便，使得其應(yīng)用環(huán)境更為隨意、寬廣，因此根據(jù)我們乾蕓儀器科技有限公司多年的行業(yè)經(jīng)驗(yàn)認(rèn)為，這種新型的針對移液器校準(zhǔn)的方法，在不久的將來，將會(huì)得到更多用戶的肯定與承認(rèn)。

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