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人源細胞轉(zhuǎn)染效率低的原因

來源:上海莼試生物技術(shù)有限公司   2018年04月17日 14:37  

人源細胞不易轉(zhuǎn)染,是因為選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境。
懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。
目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。
其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。
為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如engreen的Entranster試劑,納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對人源細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到zui低,如Entranster-E。
Menadione (Vitamin K3)    200mg    *3標準品    58-27-5 
Menthol     250mg    薄荷醇標準品    2216-51-5 
Mepenzolate Bromide    200mg    溴化甲哌佐酯標準品    76-90-4 
Mephenytoin     250mg    美芬妥因標準品    1950/12/4
Mephobarbital CIV    250mg    甲苯比妥標準品    115-38-8 
Mepivacaine Hydrochloride     200mg    *標準品    1722-62-9 
Meprednisone     200mg    甲*標準品    1247-42-3 
Meprobamate CIV    200mg    *標準品    57-53-4 
人源細胞

 

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