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ELISA試劑盒實驗質量控制方法

來源:上海琛藝實業有限公司   2019年08月16日 18:40  

ELISA試劑盒實驗質量控制方法

實驗室質量控制進入一個新的階段--全面質量治理,推行Good Laboratory Parctice(簡稱GLP)。實驗發現關于使用質控圖的實驗室室內質控,實驗室的室內質控工作正式拉序幕。全面質量治理的宗旨在于預防差錯的產生,質控圖的統計學質控的目的是檢出差錯,統計學的實驗室室內質控是全面質量治理中的一個重要環節。由于ELISA試劑盒是目前實驗上zui常用的一種免疫學檢修方法,就以ELISA檢修為例,討論下問題。
一、質量控制(Quaility Control,Q.C)
質量控制是監視全過程,排除誤差,防止變化,維持標準化現狀的一個管理過程。這一過程是通過一個反饋環路進行的。
(1)確定控制的對象;
(2)規定控制對象的標準(預期值);
(3)制定或選擇控制方法和手段;
(4)測量實際數據;
(5)比較或較對實際數據與預期值之間的差異,并說明產生這一差異的原因。超出預定誤差范圍,報警系發出信號,反饋通道中斷。
(6)采取行動,解決差異。恢復原狀(原標準狀態)的手段發揮作用。質量控制主要采用質控圖進行。質控圖是把某一檢驗的性能數據與所計算出來的預期的"控制限"進行比較的圖。這種性能數據是在按規程正常進行時,按時間順序而抽選出來的,其目的是檢測檢驗過程中變異的"可追查"性原因。"可追逆"性的誤差原因,是指除去隨機誤差以外的其他原因。"控制限"是通過統計計算出來的。 
二、誤差
    實驗誤差分為三種:系統誤差、隨機誤差和過失誤差。系統誤差是指一系列測定結果與真值或靶值存在有同一傾向的誤差,有明顯的規律性,ELISA試劑盒可在一定條件下重復出現,是可以通過質控預防和校正的。隨機誤差又稱偶然誤差,是一種偶然的、未能預料到的誤差,是難以避免和校正的誤差。檢驗工作中隨機誤差的分布符合正態分布規律。過失誤差是人為的責任誤差。通過加強實驗室管理和開展質量控制工作是可以避免的。
三、正態分布及標準差
    ELISA試劑盒試驗中,檢驗同一樣本達20次以上時,就會發現這組數據(指測定結果的吸光值)分布在均值兩側,大部分集中在均值附近。如果以測定值為橫坐標,以出現的頻率為縱坐標作圖,就可繪出一個呈鐘形的曲線圖。鐘頂處為均值,其他值以均值為中心對稱分布,這就是正態分布。正態曲線以下的面積稱概率,常用樣本的均數(X)和標準差(SD)來表示,其計算方法如下:均值、標準差和概率的關系如下:
    X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99換言之,當ELSIA檢測同一樣本達一定次數后所得的一組數據,其中靠近均值(X)的±1SD范圍內的數據,ELISA試劑盒占該組數據的68%,在X±2SD范圍內分布的數據占總體的95%,在X±3SD范圍內分布的數據占總體的99%。當我們要求檢驗結果在X±2SD范圍內為合格時,將有95%的數據可能合格。

 

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