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紫外可見分光光度計(jì)多組分析方法及使用方法:

來源:成都建欣實(shí)驗(yàn)儀器有限公司   2022年12月29日 08:16  

紫外可見分光光度計(jì)-多組分分析法在一個(gè)波長,一個(gè)溶液的總吸光度是等于各個(gè)成分的吸光度的總和。根據(jù)這點(diǎn)就可分析混合物的各個(gè)組分。如果有一種混合物,雖然是多組分,但組分吸收帶不相重迭。在某波長一種組分的吸收很大,而其它組分在此波長則無吸收。這樣就可在此波長采用上述的標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行此組分的定量測定。
     如果一個(gè)多組分混合物,其吸收帶雖然相互重迭,但能遵守比耳定律,則可以采用解聯(lián)立議程式的辦法來進(jìn)行定量。如混合物中含有n個(gè)已知組分,則需在n個(gè)適當(dāng)?shù)牟ㄩL進(jìn)行n次組分各自在n個(gè)波長的摩爾吸光系數(shù)。波長的選擇應(yīng)注意使一個(gè)組分的吸光系數(shù)比其它組分的吸光系數(shù)大,這樣才能得到較高的精確度。如果混合物中的幾個(gè)組分吸收帶相互重迭的并且不遵守比耳定律,便不能用解聯(lián)立方程式的辦法來解析。此時(shí)用分光光度法定量比較困難。Fry采用校正法把混合樣品中的五個(gè)組分配成不同的溶液,得到一系列校正曲線。在校正曲線的基礎(chǔ)上,解析得到了五組分的含量。但方法十分繁瑣,使用不便。如果混合物中含有未知吸收帶的組分就更困難了。
此時(shí)先用化學(xué)法分離純化。但也可直接利用分光光度法來分析。Morton利用有雜質(zhì)存在吸收光譜形狀的改變計(jì)算混合物中含有雜質(zhì)時(shí)的量。雖然利用分光光度法可以作多組分分析,但方法比較繁瑣。近年來,很多分光光度計(jì)設(shè)有多組分分析附件。借助于微處理機(jī)來分析計(jì)算混合物中多種組分的含量,十分簡便、迅速、準(zhǔn)確。使得分光光度法在混合的定量分析中發(fā)揮更大的作用。同樣,也可用后面介紹的導(dǎo)數(shù)光譜法來定量。
      使用注意事項(xiàng)

(一)使用的吸收池必須潔凈,并注意配對使用。量瓶、移液吸管均應(yīng)校正、洗凈后使用。
(二)取吸收池時(shí),手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè),裝盛樣品以池體的4/5為度,使用揮發(fā)性溶液時(shí)應(yīng)加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應(yīng)無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時(shí)應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈,晾干防塵保存。
(三)測定時(shí)除另有規(guī)定外,應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照,采用25px石英吸收池,在規(guī)定的吸收峰±2nm以內(nèi),測幾個(gè)點(diǎn)的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長附近自動(dòng)掃描測定,以核對供試品的吸收峰位置是否正確,并以吸收度的波長作為測定波長,除另有規(guī)定外吸收度波長應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的測定波長±2nm以內(nèi)。
(四)供試品溶液濃度除各該品種已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之間為宜。
(五)供試品應(yīng)取2份,如為對照品比較法,對照品一般也應(yīng)取2份。平行操作,每份結(jié)果對平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)。
(六)選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度值會(huì)偏低,狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn),對于大部分被測品種,可以使用2nm縫寬。


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