PCR儀溫度檢定系統(tǒng) PCR儀升降溫速率均勻性校準(zhǔn) pcr儀溫度校準(zhǔn)

在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中，PCR儀被譽(yù)為基因研究的“心臟”，其溫度控制的精確度直接決定了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。一次錯(cuò)誤的溫度循環(huán)可能導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果，甚至使數(shù)天的實(shí)驗(yàn)功虧一簣。

PCR技術(shù)通過(guò)精確的溫度循環(huán)實(shí)現(xiàn)DNA擴(kuò)增，每個(gè)循環(huán)包括變性、退火和延伸三個(gè)階段，溫度控制的微小偏差都會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增效率降低甚至失敗。

《JJF1527-2015聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準(zhǔn)規(guī)范》明確要求對(duì)PCR儀的溫度示值誤差、溫度均勻性、平均升溫速率、平均降溫速率等關(guān)鍵參數(shù)進(jìn)行定期校準(zhǔn)1。實(shí)驗(yàn)證明，僅0.5℃的溫度偏差就可能導(dǎo)致擴(kuò)增效率下降20%，使定量結(jié)果**不可靠。

校準(zhǔn)規(guī)范

《JJF1527-2015聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準(zhǔn)規(guī)范》中提出對(duì)聚合酶鏈反應(yīng)分析儀的計(jì)量特性包括溫度示值誤差、溫度均勻性、平均升溫速率、平均降溫速率、樣本示值誤差和樣本線性。校準(zhǔn)裝置包括精密溫度傳感器（通常為15個(gè)）和數(shù)據(jù)采集分析模塊，測(cè)溫范圍0-120℃，不確定度小于等于0.1℃。

如何判定PCR儀

（一）、溫度準(zhǔn)確性

溫度準(zhǔn)確性是PCR儀重要的性能指標(biāo)，如溫度準(zhǔn)確性低可直接造成非特異性擴(kuò)增，甚至是錯(cuò)誤的擴(kuò)增結(jié)果，造成假陽(yáng)性和假陰性。
市場(chǎng)上各家廠商考核基因擴(kuò)增儀（PCR儀）性能的主要指標(biāo)，一般廠家的企業(yè)指標(biāo)為±0.5℃，一些性能較好的產(chǎn)品可以實(shí)現(xiàn)的溫度準(zhǔn)確度為±0.3℃。故需對(duì)PCR儀控溫準(zhǔn)確度進(jìn)行測(cè)試。校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)平均溫度的計(jì)算公式為：I—參加檢測(cè)的溫度探頭序號(hào)；n—參加檢測(cè)的溫度探頭的數(shù)量

（二）、溫場(chǎng)均勻性

由于PCR儀加熱不均勻，導(dǎo)致PCR儀上各孔存在一定溫差。造成試驗(yàn)結(jié)果偏差。一般PCR儀邊緣點(diǎn)的溫度低于中間區(qū)域，所以均勻性為PCR儀重要的性能指標(biāo)。一般廠家的企業(yè)指標(biāo)規(guī)定均勻性為±0.5℃，一些性能較好的產(chǎn)品可以實(shí)現(xiàn)的溫度均勻度為±0.3℃。校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)時(shí)，通過(guò)選取孔板中16個(gè)特殊反應(yīng)位置來(lái)測(cè)量溫度，并得出孔板的溫度均勻性。均勻性為各個(gè)探頭在同一時(shí)刻max溫度與min 溫度的差值。

（三）、升降溫速率

PCR擴(kuò)增產(chǎn)物數(shù)量的多少?zèng)Q定了PCR的效率。為了在短時(shí)間內(nèi)獲得盡可能多的產(chǎn)物，需要儀器在升降溫段具有按照預(yù)設(shè)升降溫速率快速升溫和降溫的能力（max-升溫速率達(dá)15~20℃）。一個(gè)完整的PCR過(guò)程，是由若干個(gè)升溫→恒溫→降溫循環(huán)構(gòu)成的。因?yàn)椤白冃浴保巴嘶稹焙汀把由臁?個(gè)階段是必須要***的。因此，只有使升降溫的過(guò)程盡可能地迅速，才能縮短每個(gè)PCR循環(huán)以及整個(gè)PCR 過(guò)程所需時(shí)間。一般廠家的企業(yè)指標(biāo)規(guī)定升溫速率為±3℃/sec。
儀器校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)時(shí)，升溫速率為溫度從40℃到90℃的時(shí)間；降溫速率為溫度從70℃到35℃的時(shí)間。

（四）、max-超調(diào)溫度

超調(diào)溫度過(guò)大同樣會(huì)對(duì)試驗(yàn)產(chǎn)生影響，所以校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要計(jì)算max-超調(diào)溫度和平均超調(diào)溫度。

PCR儀溫度檢定系統(tǒng) PCR儀升降溫速率均勻性校準(zhǔn) pcr儀溫度校準(zhǔn)：

pcr儀溫度校準(zhǔn)裝置是合肥智測(cè)電子有限公司自主研發(fā)的針對(duì)PCR儀溫度測(cè)試和校準(zhǔn)應(yīng)用的專(zhuān)業(yè)性、系列化產(chǎn)品，符合國(guó)標(biāo)《JJF 1527-2015 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)分析儀校準(zhǔn)規(guī)范》。

智測(cè)電子pcr儀溫度校準(zhǔn)裝置符合《JJF1527-2015聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準(zhǔn)規(guī)范》，由精密測(cè)溫探頭、高精度測(cè)溫儀1611A和數(shù)據(jù)采集軟件組成。產(chǎn)品采用創(chuàng)新的一體化設(shè)計(jì)，在滿足高精度溫度采集的同時(shí)輕巧便攜，可對(duì)國(guó)內(nèi)外PCR儀器廠商不同型號(hào)、不同孔數(shù)（384/96/60/48/32/16/8/單孔等）的PCR儀器進(jìn)行溫度實(shí)時(shí)采集和校準(zhǔn)，滿足計(jì)量校準(zhǔn)機(jī)構(gòu)、生物實(shí)驗(yàn)室、儀器廠商對(duì)PCR儀溫度測(cè)試和校準(zhǔn)的需求。

智測(cè)電子還提供ZCTB系列高精度智能恒溫槽、PCR專(zhuān)用校準(zhǔn)等溫塊、二等標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)等裝置可以對(duì)測(cè)溫探頭進(jìn)行校準(zhǔn)，整套方案保障溫控探頭的精度。ZCTB校準(zhǔn)智能恒溫槽滿足國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程的要求，具有溫度掃描功能、上升和保持功能及自動(dòng)大功率加熱/制冷控制功能等，有優(yōu)異的溫場(chǎng)穩(wěn)定性和均勻性，升降溫速率快，噪音小。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1、多路檢測(cè)，高速采集。系統(tǒng)配備高精度測(cè)溫儀1611A，采集速度可達(dá)10ms/通道。

2、探頭響應(yīng)速度快，長(zhǎng)期穩(wěn)定性佳，符合ITS-90國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，均可溯源，滿足規(guī)程JJF1527-2015校準(zhǔn)規(guī)范的0.1℃精度要求。

3、測(cè)溫儀支持兩種供電方式，既可充電又可插電，方便實(shí)驗(yàn)室和到現(xiàn)場(chǎng)使用。

基因擴(kuò)增儀溫度校準(zhǔn)裝置 多通道PCR溫度計(jì)

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