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T25m2 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物直銷

參考價(jià)
面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)T25m2
  • 品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時(shí)間2021-06-21
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限9
  • 實(shí)名認(rèn)證已認(rèn)證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9300
  • 人氣值287700
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人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物直銷收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物直銷 產(chǎn)品詳情

收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊)
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物【Human Umbilical: Normal Umbilical Vein Endothelial Cell Derivatives】人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從人原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取的,人原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞從正常人臍靜脈內(nèi)皮組織制備。正常人臍靜脈內(nèi)皮組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mgRNA68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF-80度保存。

潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序;<4> Western and Northern Blot<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。

產(chǎn)品名稱

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物直銷

規(guī)格

T25m2

貨號(hào)

CS-963965

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4
.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5
.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min
2PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,375%CO2培養(yǎng)。
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C2 Others Mouse 小鼠 C2 / Compleme Compone 2 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5(6)-FAM, SE; 5(6)-羧基熒光素琥珀酯5(6)-FAM, SE 質(zhì)量規(guī)格:>90%

B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)S-腺苷-L-蛋氨酸;S-腺苷甲硫氨酸S-adenosyl-L-mine (SAM)質(zhì)量規(guī)格:BR,>96%,干品腺苷蛋氨酸>49%

大鼠垂體瘤細(xì)胞;GH3 膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞,T24細(xì)胞 MDBK (NBL-1)細(xì)胞,牛腎細(xì)胞5(6)-ROX ;5(6)-羧基-X-羅丹明鹽酸鹽5(6)-Carboxy-X- rhodamine; 5(6)-ROX  質(zhì)量規(guī)格:>95%,進(jìn)分

HNE2, 鼻咽癌細(xì)胞系 Human5-羥基-2-金剛烷酮5-hydroxy-2-adamantanone 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%

LUM Others Human  LUM / Lumican / LDC 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 右佐匹克隆Es質(zhì)量規(guī)格:>99%
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物直銷PRSS3 Others Human  ypsin-3 / PRSS3 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 水楊酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定Salicylamide

Asp2胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞;FC33非普拉宗(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:UV法溶出度檢查Feprazone

SRC Others Human  SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 茴三硫;膽維他質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRAnethole trithione

CM-H022前列腺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL茴三硫(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Anethole trithione

kasumi-1, 白血病細(xì)胞株 橫紋肌癌細(xì)胞,A673細(xì)胞 穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的胚腎細(xì)胞;293E鹽酸卡替洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:鑒別2(1H)-QUINOLINONE

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