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免疫共沉淀(Co-IP)優缺點小結2023/11/28
以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法，是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。其原理是：當細胞在非變性條件下被裂解時，完整細胞內存在的許多蛋白質－蛋白質間...
顆粒培養基使用方法與注意事項2023/11/20
使用方法：1、取瓶內弧菌顯色培養基干粉71.3克，用1000ml蒸餾水或純水溶解，可按比例擴增或縮小。攪拌加熱煮沸至*溶解，不需高壓滅菌，冷至約50℃，傾注滅菌平皿。2、以無菌操作取檢樣25g(mL)...
培養微生物6大營養來源解讀2023/11/13
微生物不是專用于生物分類學的名詞，而是指一般需借助顯微鏡才能看清的所有微小生物的統稱，數量龐大且多樣。微生物中的“微”便是它的特點之一，是人眼不能直接看到的，有些微生物只有粉塵那么大，而有些微生物更小...
人彈性蛋白（ELN）檢測試劑盒應用注意事項2023/11/6
人彈性蛋白（ELN）檢測試劑盒應用注意事項：1．ELISA試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀...
科研抗體的制備過程2023/10/30
抗體的制備過程：1.免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其...
小鼠骨髓多能干細胞培養操作2023/10/23
小鼠骨髓多能干細胞培養操作：培養操作：一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基...
多胺氧化酶(PAO)測試盒比色法活性計算2023/10/17
測定原理：PAO催化多胺氧化產生過氧化氫，在過氧化物酶存在的條件下與底物顯色，在550nm下有特征吸收峰，通過測定吸光值增加速率來反映PAO活性。PAO活性計算：1、按樣本蛋白濃度計算：單位定義：每m...
培養基?間歇滅菌與連續滅菌比較2023/10/8
培養基間歇滅菌與連續滅菌比較:1、歇滅菌的優點和缺點優點是設備要求低，不需另外設置加熱、冷卻裝置；操作要求低，適于手動操作，適合于小批量生產規模；適合于含有大量固體物質的培養基的滅菌。缺點是培養基的營...
原代細胞與傳代細胞培養不同點分析2023/10/5
區別一：定義不同原代細胞培養：原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首培養，也叫初代培養。傳代細胞培養：傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分，重新接種到另外的培養器皿（瓶）內，再進行培養的過程。對單...
擴增曲線的四個時期解釋2023/9/25
擴增曲線是描述PCR動態進程的曲線，以循環數為橫坐標，以反應過程中實時熒光信號強度為縱坐標。理論上PCR過程中反應產物是以指數增長的，但隨著PCR循環數的增加，DNA聚合酶失活、dNTP和引物枯竭、反...
PCR反應結果無擴增條帶分析2023/9/18
PCR反應結果無擴增條帶分析:1、酶失活或在反應體系中未加入酶。TaqDNA聚合酶因保存或運輸不當而失活，往往通過更換新酶或用另一來源的酶以獲得滿意的結果。2、模板含有雜質。特別是對甲醛固定及石蠟包埋...
細胞凍存及復蘇操作步驟2023/9/11
細胞凍存及復蘇操作步驟：一、凍存1、消化細胞，將細胞懸液收集至離心管中。2、1000rpm離心10分鐘，棄上清液。3、沉淀加含保護液的培養，計數，調整至5×106/ml左右。4、將懸液分至凍存管中，每...
PCR反應循環參數注釋2023/9/8
循環參數:1.預變性模板DNAwan全變性與PCR酶的wan全激活對PCR能否成功至關重要，建議加熱時間參考試劑說明書，一般未修飾的Taq酶激活時間為兩分鐘。2.變性步驟循環中一般95℃，30秒足以使...
單克隆抗體的性質鑒定方法2023/8/28
當獲得多個雜交瘤細胞株時，要了解哪一株是zui適用的，則一定要通過各種鑒定。分析常見的方法有：（一）Ig類型測定通常以免抗小鼠Ig類及亞類抗體與培養液中單克隆抗體按雙向瓊脂擴散法進行測定，確定其Ig類...
胎牛血清質控外觀判定要素2023/8/21
拿到血清，zui先接觸的是血清外觀，對于缺少細胞培養經驗的人來說，外觀的判斷尤為重要。1、顏色根據血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現出黃色或紅色，我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl，實際上...
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