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逆轉錄實驗三大要素講解2025/6/4

逆轉錄是以RNA為模板合成DNA的過程，即RNA指導下的DNA合成，逆轉錄實驗包括3大要素，分別是引物、逆轉錄酶和RNA模板：1.引物：逆轉錄引物主要有3種，包括Oligo（dT）、RandomPri...

PCR反應擴增DNA的原理2025/5/27

先將含有所需擴增分析序列的靶DNA雙鏈經熱變性處理解開為兩個寡聚核苷酸單鏈，然后加入一對根據已知DNA序列由人工合成的與所擴增的DNA兩端鄰近序列互補的寡聚核苷酸片段作為引物，即左右引物。此引物范圍就...

細胞生長過程期間介紹2025/5/14

細胞生長過程：游離期；貼壁期；潛伏期；對數生長期；停止期（平臺期）1.游離期：細胞接種后在培養基中呈懸浮狀態，也稱懸浮期。此時細胞質回縮，胞體呈圓球形（10min-5h）。2.貼壁期：細胞附著于底物上...

聚合酶鏈反應(PCR)技術循環參數分析2025/5/6

聚合酶鏈反應(PCR)技術是在體外進行的由引物介導的酶促DNA擴增反應。PCR的原理是在模板DNA、PCR引物、四種脫氧核糖核苷酸(dNTP)及適當濃度的Mg2+存在的條件下，依賴于DNA聚合酶的體外...

蛋白質免疫印跡(wb)的實驗步驟2025/4/27

Westernblot（也稱為蛋白質免疫印跡）是一種常用于研究中分離和鑒定蛋白質的技術。它利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)來分離指定樣品中包含的各種蛋白質，然后將分離的蛋白質轉移到硝...

ELISA標準品正確溶解與稀釋2025/4/21

正確溶解與稀釋ELISA標準品ELISA標準曲線是結果計算的尺子，標準品是ELISA實驗成功與否的關鍵點。怎樣正確溶解、稀釋標準品呢？1.粉末標準品短暫離心，讓因運輸沾到管蓋、管壁的標準品沉到管底。2...

細胞適應無血清培養基的方法2025/4/14

細胞適應無血清培養基的方法：1.直接適應——細胞從添加血清的培養基轉換到無血清培養基（SFM）中。一些類型細胞可直接從包含血清的培養基適應無血清培養基。對于直接適應，接種細胞密度應該:2.5×105~...

標準物質的制備一般步驟2025/4/7

標準物質的制備是一個關鍵的過程，確保其質量和可追溯性。下面是標準物質的制備一般步驟：1、確定目標物質和純度要求：確定所需的目標物質以及其純度要求。這可能涉及從商業供應商購買純品，從自然來源提取物質，或...

PCR反應的三個基本步驟介紹2025/3/31

PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性-退火-延伸三個基本反應步驟構成：1、模板DNA的變性：模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后...

實時熒光定量PCR（qPCR）技術簡介2025/3/24

熒光定量PCR也叫Real-TimePCR，是美國PE（PerkinElmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。熒光定量PCR的發展史是一部ABI、羅氏和伯樂等的蕩氣回腸的斗爭史，感興趣...

抗體依據重鏈抗原性分類及其主要功能2025/3/17

抗體依據重鏈抗原性的不同分為五類：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。各類抗體主要功能有：IgG：血清中含量最高，因此是最重要的抗感染分子，包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG還能激活補體，結合并增...

細胞凋亡實驗原理是什么？2025/3/11

細胞凋亡是細胞的一種基本生物學現象，在多細胞生物去除不需要的或異常的細胞中起著必要的作用。它在生物體的進化、內環境的穩定以及多個系統的發育中起著重要的作用。細胞凋亡不僅是一種特殊的細胞死亡類型，而且具...

實驗室試劑貯存應注意什么？2025/3/3

實驗室試劑貯存應注意點：一、避光其實在實驗室中很多化學試劑見強光都極易揮發變質，所以為避免試劑受到光的輻射，應采用棕色玻璃瓶，外用黑紙包裹，并貯藏于暗室或遮光的試劑柜中。避光保存適用于能進行光化學反應...

ELISA試劑盒包被用抗原解析2025/2/24

ELISA試劑盒包被用抗原解析：用于包被固相載體的抗原按其來源不同可分為天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。天然抗原可取自動物組織、微生物培養物等，須經提取純化才能作包被用。如HBsAg可以從攜帶...

微生物培養基配置一般過程2025/2/17

培養基(culturemedium)是人工配制的，適合微生物生長、分離鑒別的營養基礎。一般基礎培養基中古有蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、瓊脂等基本營養物質。微生物培養基應用范圍很廣。例如，無菌試...