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大鼠檢測試劑盒測定步驟方法

時間:2021/4/27閱讀:250
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大鼠檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法:

1、   血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2、   血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、   細胞上清液---1000×g離心10分鐘除顆粒和聚合物。

4、   組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液

5、   保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

大鼠檢測試劑盒測定步驟:

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡

2.溫浴

1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

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