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貨號(hào)	A01X1115	規(guī)格	1×106
英文名稱	TM4細(xì)胞	產(chǎn)品分類	小鼠細(xì)胞系
實(shí)驗(yàn)類型	DMEM/F12+2.5%FBS+5%馬血清+1%P/S	報(bào)告	（STR鼠源鑒定）報(bào)告

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

名稱	TM4 (正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞) (種屬鑒定正確)
別稱	TM-4
種屬	小鼠
年齡（性別）	11-13日齡
組織來源	睪丸
生長(zhǎng)特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
背景描述	TM4細(xì)胞在FSH的作用下cAMP產(chǎn)量增加，但對(duì)LH無(wú)反應(yīng)；TM4細(xì)胞與原代Sertoli細(xì)胞相比，對(duì)FSH的反應(yīng)性降低。據(jù)報(bào)道，TM4細(xì)胞組成性纖溶酶原激活物的產(chǎn)量很低，但可被FSH刺激產(chǎn)生，受維甲酸刺激可有大幅增高。TM4細(xì)胞可產(chǎn)生視黃結(jié)合蛋白、組織纖溶酶原激活物和轉(zhuǎn)鐵蛋白；TM4細(xì)胞表達(dá)FSH受體、雄激素受體和孕激素受體；鼠痘病毒陰性。
生物安全等級(jí)	1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基	DMEM/F12＋5% HS＋2.5% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例	1:3-1:4
推薦換液頻率	2~3次/周
凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃
致瘤性	No, The cells were not tumorigenic in immunosuppressed mice, but did form colonies in semisolid medium.
基因表達(dá)情況	retinol binding protein, tissue plasminogen activator, transferrin
保藏機(jī)構(gòu)	ATCC; CRL-1715 BCRC; 60254 ECACC; 88111401

細(xì)胞傳代：

1. TM4正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞試驗(yàn)準(zhǔn)備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號(hào)筆，培養(yǎng)皿，離心管。

2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細(xì)胞從壁上脫落下來為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。

5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細(xì)胞分散開。

6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。

7. 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)后選擇 0.8X106 個(gè)細(xì)胞加入一個(gè) 35mm 培養(yǎng)皿。

8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。

9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染：

1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個(gè)轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無(wú)血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。

高表達(dá)神經(jīng)上皮蛋白BTG3封閉多肽	轉(zhuǎn)輪蟹通用PCR檢測(cè)試劑盒直銷
衣原體通用PCR試劑盒	肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體ELISA試劑盒
人膽囊收縮su/縮膽囊su八肽(CCK-8)ELISA試劑盒	鈣調(diào)蛋白2ELISA試劑盒
人15-epi-氧脂su A4(15-epi-LXA4)ELISA檢測(cè)試劑盒	真核翻譯延伸因子1γELISA試劑盒
纖維介su蛋白(fgl2)elisa試劑盒	鈣聯(lián)接蛋白ELISA試劑盒
人c-fos 試劑盒ELISA	中心體蛋白3ELISA試劑盒
緊密連接蛋白3封閉多肽	諾氏梭狀芽孢桿菌PCR試劑盒
FAM177A1蛋白封閉多肽	馬隱秘桿菌PCR試劑盒
E3泛su蛋白連接meiCOP1封閉多肽	點(diǎn)狀古柏線蟲PCR試劑盒
粘蛋白17封閉多肽	戊型肝炎病毒(HEV)核suan檢測(cè)試劑盒
EB病毒核抗原-3A封閉多肽	七星庫(kù)道蟲PCR檢測(cè)試劑盒
芳香乙酰胺脫乙?；?/span>mei樣蛋白3封閉多肽	TM4正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞貓庖疹病毒PCR試劑盒
腎細(xì)胞癌抗原nyren39封閉多肽	貓白血病病毒RT-PCR試劑盒
磷suan化α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin封閉多肽	普雷沃菌屬通用PCR試劑盒
牛血清白蛋白（第五組分）	葡萄孢菌PCR試劑盒

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：
①進(jìn)無(wú)菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動(dòng)作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長(zhǎng)時(shí)間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時(shí)間太長(zhǎng)，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時(shí)盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。