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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測(cè)試盒微量法

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更新時(shí)間:2022-08-18 17:00:30瀏覽次數(shù):222次

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貨號(hào) BJ-01611230-1
海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移PCAF抗體PLGF (Placenta growth factor fragment)(human) 人胎盤生長(zhǎng)因子(多肽抗原)
磷化原癌因c-kit抗體PP-1 蛋白磷酯-1(抗原)
PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒人胚肺二倍體;2BS狀原氨(T3)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
AATF 拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體總C(TPC)ELI

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱

檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測(cè)試盒微量法

微量法

100管/48樣

BJ-01611230-1

商品介紹:

測(cè)定意義:

海藻糖又稱為漏蘆糖、蕈糖,是由兩個(gè)葡萄糖分子組成的一個(gè)非還原性雙糖,能夠在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環(huán)境條件下在細(xì)胞表面形成du特的保護(hù)膜,有效地保護(hù)生物分子結(jié)構(gòu)不被破壞,從而維持生命體的生命過程和生物特征。

植物體內(nèi)主要以葡萄糖為底物合成海藻糖,海藻糖-6-磷酸酯酶 (trehalose 6-phosphate phosphatase,TPP)是該途徑中海藻糖合成關(guān)鍵酶之一,該反應(yīng)首先在海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)的作用下,催化尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)和 6-磷酸葡萄糖生成中間產(chǎn)物6-磷酸海藻糖,再在TPP的作用下去磷酸化,生成海藻糖。

測(cè)定原理:

TPP催化海藻糖-6-磷酸產(chǎn)生海藻糖,同時(shí)釋放出磷酸根,使用鉬銻抗比色法測(cè)定。

需自備的儀器和用品:  

酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

優(yōu)點(diǎn)如下:

1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn): X =103.3%。

7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。

8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

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測(cè)定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。

注意事項(xiàng):

待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。

一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

膜相關(guān)環(huán)指蛋白10抗體荔枝索氏梭狀芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體東方伊薩酵母庫(kù)蚊通用探針法熒光定量PCR試劑盒

粘膜血管定居因子抗體色串孢屬節(jié)片代凡絳蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

抑癌基因抗體棲果盤孢毛細(xì)線蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒

神經(jīng)上皮酪ansuan激酶/癌激酶10抗體停滯棒桿菌山羊皰疹病通用探針法熒光定量PCR試劑盒

MHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)合物MHCIa抗體枯草芽孢桿菌枯草亞種霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒

中腦核仁蛋白抗體人葡萄球菌節(jié)狀古柏線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

巨噬移動(dòng)抑制因子抗體冰川金色單胞菌白喉棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

巨噬炎癥因子1α抗體 MIP-1α褐紅小孔菌倍贊氏金蠅探針法熒光定量PCR試劑盒

蕈型乙酰受體M1抗體紅細(xì)菌屬肉梭狀芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體Corynebacterium variabile溶血梭狀芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體南海雷氏菌貝氏隱孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體熱橄欖鏈霉菌褐色變種蛇形隱孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗體副豬嗜血桿菌牛棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

髓鞘性蛋白/磷脂性蛋白抗體四川散斑殼激隱核蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測(cè)試盒微量法通用轉(zhuǎn)錄因子II F肽1(GTF2F1)試劑盒Anti-RNF169 Antibody抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG

胰島su降解酶(IDE)試劑盒Anti-RNF168 Antibody抗水貂IgG

嗜環(huán)蛋白/親環(huán)suA(CYPA)試劑盒 Anti-RNF31 Antibody驢抗人IgG

脂肪suan結(jié)合蛋白1(FABP1)試劑盒Anti-RNF186 Antibody驢抗IgG

suan粒趨化因子受體(ECFR)試劑盒 Anti-RNF123 Antibody驢抗IgG

性結(jié)合球蛋白(SHBG)試劑盒Anti-RNF43 Antibody鼠抗人IgG單克隆

多巴受體D1(D1R/DRD1)試劑盒 Anti-RNF8 AntibodyPE-Cy5.5標(biāo)記的抗犬IgM   

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后


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