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ELISA可用于測定抗原,測定方法中有三個必要的試劑

時間:2019/2/26閱讀:269
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 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑:
  (1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);
  (2)酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);
  (3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件,可設(shè)計出各種不類型的檢測方法。
    ELISA可根據(jù)抗原抗體的結(jié)合情況來分類為以下兩種方法。
    直接法(direct ELISA)
    將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標(biāo)記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。
    優(yōu)勢:操作手續(xù)簡短,因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。
    缺點:試驗中的一抗都得用酶標(biāo)記,但不是每種抗體都適合做標(biāo)記,費用相對提高。
    間接法(indirect ELISA)
    此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標(biāo)記,改用酶標(biāo)記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
    優(yōu)勢:二抗可以加強(qiáng)信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標(biāo)記的一級抗體則能保留它*多的免疫反應(yīng)性。
    缺點:交互反應(yīng)發(fā)生的機(jī)率較高。

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