网红主播精品视频在线观看_草久在线播放_免费人成在线观看成人片_国产高清乱子精品偷伦对白_国产无遮挡色视频免费观看性色_亚洲精品色婷婷在线影院

上海莼試生物技術有限公司
初級會員 | 第9年

13585831301

大鼠纖維母細胞;1/EJ 1-1復蘇操作流程

時間:2021/7/13閱讀:200
分享:

大鼠纖維母細胞;1/EJ 1-1復蘇操作流程:
 

1. 準備工作,開水浴鍋,預熱試劑,超凈工作臺紫外照射 30min,找到對應細胞在液氮罐中的位置
2. 紫外照射后風機吹 10min 后,酒精擦拭臺面,放入試劑和離心管,取 15ml 離心管,加入 9ml 培養液
3. 在液氮罐中取出細胞,先擰松放液氮,再擰緊,將凍存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后取出,1-2min
4. 將凍存管噴酒精后放入超凈臺內,擦干管壁,用 1ml 頭將細胞轉移到已加培養液的離心管中
5. 800-1000rpm 離心 5min,注意配平
6. 將離心好的細胞棄上清,加入 5ml *培養基重懸,用移液管吹打 8-10 次, 避免產生氣泡,將細胞懸液接種到 10cm 培養皿中,補加 5ml 培養液
7. 混勻,十字法或者 8 字法
8. 將混好的細胞放入培養箱中培養 復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 国产日韩欧美东南在线 | 亚洲老熟女与小伙bbwtv | 日韩一区二区三区高清免费看看 | 午夜男女爽爽爽免费播放 | 第一亚洲中文久久精品无码 | 跪趴式啪啪gif动态图27报 | 欧美成a人片 | 夜夜草网站 | 无码aⅴ免费中文字幕久久 强开少妇嫩苞又嫩又紧九色 | 特级片免费看 | 国产呦系列呦交 | 日韩国产精品视频二区 | 国产成人精品无码免费看夜聊软件 | 福利精品视频 | 日韩免费无码视频一区二区三区 | 亚洲欧美精品伊人久久 | 亚洲精品字幕在线观看 | 日韩一级少妇 | 9191国产精品 | 成年女人喷潮毛片免费播放 | av高清免费 | 青青操天天干 | 亚洲欧美日韩精品专区 | 在线观看麻豆传媒 | 亚洲精品中文字幕一区二区三区 | 国产麻豆果冻在线播放 | 亚洲丁香五月激情综合 | 男人亚洲天堂网 | 成人激情久久 | 亚洲精品中文字幕乱码4区 国产伦精品一区二区三区无广告 | 小早川怜子久久精品中文字幕 | 午夜视频在线观看一区二区 | 国产一区二区三区国产精品 | 日韩国产综合av | java性无码hd中文 | 国内精品视频666 | 国产内谢 | 成人国产精品一区二区视频 | 国产寡妇XXXX猛交巴巴 | 日本不卡不码高清视频 | 巨女丰满爆乳潮喷喷汁视频 |